做項(xiàng)目只能從頭摸索調(diào)研大量文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，包出來的病毒滴度很低，穩(wěn)定性很差，不知道怎么才能提高感染效率，為了諸如此類的問題而日夜發(fā)愁。。。

這，是不是屏幕前的你的科研現(xiàn)狀？

那么，不如把病毒包裝這項(xiàng)難度偏高的工作交給擁有多年相關(guān)經(jīng)驗(yàn)的賽業(yè)生物吧。

AAV病毒包裝常見問題解答（節(jié)選）

Q1

實(shí)現(xiàn)AAV在動物體內(nèi)表達(dá)需要注意哪些關(guān)鍵點(diǎn)？

??血清型的選擇

AAV的血清型主要由AAV衣殼蛋白的結(jié)構(gòu)所決定，不同的衣殼蛋白結(jié)構(gòu)識別不同的細(xì)胞表面受體，因此血清型的選擇會影響AAV的感染效率、組織親和性和開始表達(dá)的時間。

??啟動子的選擇

需要看是選擇廣譜性啟動子還是特異性啟動子。相比于血清型的組織特異性，特異性啟動子可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的特異性，因此對特異性要求較高的研究，可以選擇某種細(xì)胞特異性表達(dá)的啟動子。

??注射方式

例如，對于可以進(jìn)行局部注射的組織器官，采用局部多點(diǎn)注射靶器官可取得較好的特異性和表達(dá)效果。

??病毒量及滴度

根據(jù)不同的靶器官組織和所使用的不同AAV血清型（擴(kuò)散能力不同），推薦注射的AAV量不同，傳遞到組織中的病毒顆粒數(shù)量對于感染效果影響很大。但AAV使用量并不是越多越好，過多的量可能出現(xiàn)病毒溢出，且根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)，病毒量太多有時候甚至?xí)?dǎo)致表達(dá)降低的情況。

??檢測時間

不同基因的表達(dá)高峰時間是不同的，再加上AAV需要從單鏈DNA變成雙鏈DNA，一般在2周可檢測到基因表達(dá)，如無抗體產(chǎn)生的影響，基因的表達(dá)可持續(xù)表達(dá)半年以上的時間。

Q2

如何通過AAV實(shí)現(xiàn)體內(nèi)的特異性表達(dá)

其實(shí)，不止是病毒量及滴度會影響到其在小鼠體內(nèi)的表達(dá)，我們還需要綜合考慮多個方面的因素。實(shí)現(xiàn)體內(nèi)特異性調(diào)控有以下常見的4種策略：