艾美捷Fluorochrome GFAP抗體基本操作
Fluorochrome GFAP抗體(FC50001)背景:
GFAP是成熟膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物。這種抗體是多克隆的,在兔體內(nèi)培養(yǎng)至肽序列NAGFKETRASERAE(人、大鼠和小鼠),通過戊二醛,然后注射到兔子體內(nèi)。該抗體已用于大鼠和人腦組織的免疫細(xì)胞化學(xué)。
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小瓶中含有約200ul,稀釋度為抗體可在BSA稀釋劑(50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中進(jìn)一步稀釋至至少1/30000??贵w應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。還包括濾紙用于阻斷的特異性肽。可將500ul稀釋的抗體加入試管中uM塊。在室溫(RT)下孵育至少1小時(shí),然后施用于組織??贵w與該肽特異性阻斷,而不與濾紙上吸收的其他肽阻斷。
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GFAP抗體(FC50001)基本參數(shù):
中文名稱:GFAP抗體
英文名字:GFAP Antibody -W
cat#:FC50001
規(guī)格:200ul
應(yīng)用類型:IHC
免疫原:這種抗體是多克隆抗體,在兔體內(nèi)產(chǎn)生的肽序列是NAGFKETRASERAE(人、大鼠和小鼠),在注射到兔體內(nèi)之前,用戊二醛將其與甲狀腺球蛋白偶聯(lián)。
來源宿主:兔
反應(yīng)性:人,大鼠
保存建議:小瓶中含有約200微升1/100稀釋液。 抗體可在BSA稀釋液(50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中進(jìn)一步稀釋至至少1/20,000。 抗體應(yīng)在-20 ℃下儲(chǔ)存。 還包括吸附有用于封閉的特異性肽的濾紙。 可向管中加入500 μ l稀釋的抗體以獲得10 μ M阻斷。 應(yīng)用于組織前,在室溫(RT)下孵育至少1小時(shí)。 抗體特異性地與該肽阻斷,而不與吸附在濾紙上的其他肽阻斷。
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GFAP抗體(FC50001)基本操作:
將新鮮冷凍的10-30微米切片在室溫下固定在4%多聚甲醛(FA)中1小時(shí)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS),并在PBS中與0.1-0.3%H2O2孵育10至30分鐘。這個(gè)再次在PBS中洗滌組織,然后用Avidin/Biotin阻斷試劑盒(Vector cat#SP-2001)處理,洗滌并在室溫下用BSA稀釋劑孵育1小時(shí)。將GFAP抗體(1/30000)應(yīng)用于組織在室溫下過夜。
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在PBS中洗滌后,將切片在1/1000的生物素化GAR中孵育(Vector labs cat#BA1000)在室溫下1小時(shí),洗滌,然后在阿維丁/生物素中以1/1000(Vector labs cat#PK6100)在室溫下1小時(shí)。洗滌后,用二氨基聯(lián)苯胺(0.04%)在0.1M乙酸鈉與0.06%H2O2混合六分鐘(也可加入2.5%的氯化鎳)。然后對(duì)切片進(jìn)行水洗(如果需要,進(jìn)行復(fù)染)、脫水并蓋上蓋子。
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Fluorochrome GFAP抗體(FC50001)也適用于Fluorochrome有限責(zé)任公司出售的BRDU抗體可視化方案??梢允褂?%FA灌注組織代替新鮮冷凍切片。