冷凍電鏡技術(shù)
2022-05-07 07:58 作者:西北大學(xué)木香園 | 我要投稿
在不需要對(duì)樣品進(jìn)行結(jié)晶、純度要求相對(duì)較低的狀態(tài)下,在原子分辨率水平成為結(jié)構(gòu)生物學(xué)當(dāng)下利器。
在表觀遺傳學(xué)研究領(lǐng)域,冷凍電鏡被應(yīng)用到染色質(zhì)重塑復(fù)合物、組蛋白修飾復(fù)合物和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白解析方面。這些數(shù)量眾多、分子量巨大和高度動(dòng)態(tài)變化的復(fù)合物,幾乎很難采用結(jié)晶方法進(jìn)行解析。例如,INO80 復(fù)合物,2013年利用冷凍電鏡解析,發(fā)現(xiàn)釀酒酵母INO80含有15個(gè)亞基,呈延伸的胚胎狀結(jié)構(gòu),看起來(lái)象用一只手抓住核小體、三面包圍結(jié)合于核小體。
在染色質(zhì)結(jié)構(gòu)方面,采用冷凍電鏡深入研究了30 nm染色質(zhì)纖維結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示在體外組裝過(guò)程中,H1組蛋白介導(dǎo)形成染色質(zhì)纖維成左手螺旋結(jié)構(gòu),4個(gè)核小體形成一個(gè)結(jié)構(gòu)單元,4聚核小體之間間隙可能是表觀修飾作用空間。
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