GelRed&GelGreen:靈敏度碾壓EtBr、SYBR Safe
幾十年來(lái),EtBr?一直是用于核酸染色的主要染料,因?yàn)樗鼉r(jià)格低廉且通常具有足夠的靈敏度。然而,EtBr?是一種高度致突變物質(zhì)。與去污和廢物處理相關(guān)的安全隱患和成本最終會(huì)使核酸染料的使用變得昂貴。出于這個(gè)原因,近年來(lái),各種溴化乙錠替代?DNA?凝膠染料已在市場(chǎng)上銷售。盡管這些可供選擇的核酸染色染料在市場(chǎng)上以低誘變性銷售,但它們通常不得不犧牲染料的其他方面。例如,SYBR? Safe?的靈敏度非常有限,而?SYBR? Green?和?SYBR? Gold?的穩(wěn)定性遠(yuǎn)低于?EtBr。此外,許多所謂的“安全”DNA?染料,如?Midori Green、GreenSafe、SafeView? 和?RedSafe?,不僅靈敏度低,但也很容易穿透活細(xì)胞與?DNA?結(jié)合,有些具有細(xì)胞毒性。
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溴化乙錠?(EtBr)?和?GelRed??在預(yù)制凝膠染色中的比較,使用?TBE?緩沖液中的?1%?瓊脂糖凝膠。1 kb Plus DNA Ladder (Invitrogen)?的兩倍系列稀釋液從左到右以?200 ng、100 ng、50 ng?和?25 ng?的量加載。使用?300 nm?透照儀對(duì)凝膠成像,并使用?EtBr?濾光片拍照。GelGreen??是?SYBR? Safe?無(wú)法比擬的(圖1)
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圖1:GelGreen??和?SYBR Safe?在?1%?瓊脂糖/TBE?凝膠電泳后染色的比較。1 kb Plus DNA Ladder (Invitrogen)?的兩倍連續(xù)稀釋(200 ng、100 ng、50 ng?和?25 ng)。使用?254 nm?紫外透照儀對(duì)凝膠成像,并使用?SYBR?濾光片拍照。:
圖2:GelRed??和?GelGreen??與?DNA?的激發(fā)和發(fā)射光譜。
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艾美捷GelRed&GelGreen核酸染料:
產(chǎn)品名稱?目錄編號(hào)?尺寸
GelRed? 10,000X?水中?41003-T?0.1?毫升(試用裝)
41003?0.5?毫升
41003-1?10毫升
GelGreen? 10,000X?水中?41005?0.5?毫升
41005-1?10毫升
GelRed? 3X?水溶液?41001?4?公升
6X GelRed? Prestain?上樣緩沖液,橙色示蹤染料?41010?1毫升
GelRed? Prestain Plus 6X DNA?上樣染料?41011?1毫升
GelRed??瓊脂糖?LE?41029-5G?5克
41029-50G?50克
GelGreen??瓊脂糖?LE?41030-5G?5克
41030-50G?50克