組培苗的玻璃化及防治

組培苗的玻璃化

在進行植物組織培養(yǎng)時，經常會發(fā)現試管苗生長異常，表現為試管苗葉、嫩梢呈水晶透明或半透時，水浸狀；整株矮小腫脹、失綠；葉片皺縮成縱向卷曲、脆弱易碎；葉表缺少角質層蠟質，沒有功能性氣孔，不具有柵欄組織，僅有海綿組織。這種試管苗生長異?，F象就是?“玻璃化”（Vitrification），是植物組織培養(yǎng)過程中所特有的一種生理失調或生理病變。玻璃苗中因其體內含水量高，干物質、葉綠素、蛋白質、纖維素和森質素含量低、角質層、柵欄組織等發(fā)育不全，表現為光合能力和酶活性降低，組織畸形，器官功能不全，分化能力降低，所以很難繼續(xù)用作繼代培養(yǎng)和擴大繁殖的材料；生根困難，移栽后也很難成活。

植物微體快速繁殖時玻璃苗的出現已成為一種很普遍的現象，該苗有時多達50%以上，嚴重影響繁殖率的提高，已成為莖尖脫毒、工廠化育苗和材料保存等方面的嚴重障礙，造成人、財、物的極大浪費，所以試管苗下班化現象對植物組織培養(yǎng)的危害是相當嚴重的，也是亟待解決的問題。

導致玻璃化的主要因素：

1．材料差異，在不同的種類、品種間，組培苗的玻璃化程度有所差異。

2．激素水平過高，若細胞分裂素濃度過高或細胞分裂素與生長素相對含量高，易引起玻璃化現象。

3．培養(yǎng)基水勢，培養(yǎng)基中離子種類，比例不適。

4．環(huán)境溫度、光照強度和通氣性。溫度過低或過高，光照時間強度不足及培養(yǎng)容器中空氣濕度過高，透氣性較差所造成的通氣不良，易造成組培苗含水量高，從而發(fā)生玻璃化現象。

5．瓊脂濃度降低、有雜質等。

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常用的防治措施有：

1．增加光照強度和光照時數。

2．降低細胞分裂素含量。在培養(yǎng)基中添加少量聚乙烯醇、脫落酸等物質，能夠在一定程度上減輕玻璃化的現象發(fā)生。

3．增大培養(yǎng)基中瓊脂的含量，以降低培養(yǎng)基的水勢。

4．降低NH4+濃度，減少培養(yǎng)基中含氮化合物的用量。

5．增加容器通風，最好進行?CO2施肥，這對減輕組培苗玻璃化的現象有明顯的作用；降低培養(yǎng)溫度，進行變溫培養(yǎng)，有助于減輕組培苗玻璃化的現象發(fā)生。

組培苗的黃化及防治

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組培苗的黃化

黃化是指在組培過程中由于培養(yǎng)基成分、環(huán)境、激素、碳水化合物等各種因素引起的幼苗整株失綠，全部或部分葉片黃化、斑駁。這一現象在植物組織培養(yǎng)中比較常見，特別在部分木本植物、花卉中較為常見。

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影響組培苗黃化的因素

1、培養(yǎng)基中Fe的含量不足, 各礦質營養(yǎng)不均衡；

2、培養(yǎng)環(huán)境通氣不良，瓶內乙烯含量升高；

3、激素配比不當；

4、PH值變化過大；

5、糖用量不足或長時間不轉移糖已耗盡；

6、培養(yǎng)溫度不適；光照不足等。

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防治組培苗黃化的方法

1、首先在配制母液和培養(yǎng)基的制作過程中，要檢查儀器設備是否準確，還要認真細致地核對每項稱量的每一個環(huán)節(jié)；

2、使用透氣的封口膜以改善瓶內通氣狀況；

3、適當調節(jié)pH值、激素配比和無機鹽濃度；

4、配制培養(yǎng)基時切記不要忘記加糖,及時轉接培養(yǎng)物；

5、控制培養(yǎng)室內的溫度,適當增加光照；

6、在培養(yǎng)基中添加抗生素類物質如青霉素、鏈霉素、頭孢霉素等，有時也會出現幼苗黃化現象，應適當減少用量或停止使用。

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組培苗的褐變及防治

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組培苗的褐變

很多種類的植物體中含有大量多酚類化合物，切取芽時的創(chuàng)傷會激活組織中的多酚氧化酶，將多酚類物質氧化為棕褐色的醌類物質，使外植體的切口處發(fā)生褐變，產生可見的茶色、褐色或黑色，此即謂“酚污染”。醌類物質會滲透到培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基褐化，其結果是嚴重影響培養(yǎng)物的生長和分化，甚至造成培養(yǎng)物死亡。在木本植物，尤其是熱帶木本植物及少量草本植物中，此現象較為嚴重。

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影響褐變的因素

植物的種類褐基因型、外植體的來源和生理狀況以及培養(yǎng)基的成分都會不同程度的影響褐變的程度。一般木本植物的外植體比較容易產生褐變現象，在成年樹尤其嚴重。培養(yǎng)基中含酚過高會導致褐變，含過高濃度的無機鹽和肌醇也會加劇外植體的褐變。6-芐氨基嘌呤（6-BA）和激動素（KT）也有誘導褐變的作用。強光和高溫同樣會促進褐變現象。