在做掃描電子顯微鏡（SEM）測試時，科學(xué)指南針檢測平臺工作人員在與很多同學(xué)溝通中了解到，好多同學(xué)對SEM測試不太了解，針對此，科學(xué)指南針檢測平臺團(tuán)隊組織相關(guān)同事對網(wǎng)上海量知識進(jìn)行整理，希望可以幫助到科研圈的伙伴們；

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空氣干燥法

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空氣干燥法又稱自然干燥法，就是將經(jīng)過脫水的樣品，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。

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方法：脫水至無水狀態(tài)，為減緩其揮發(fā)速度，退回至85%脫水劑，取出，空氣中自然干燥。

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優(yōu)點(diǎn)：脫水劑為低表面張力物質(zhì)，揮發(fā)過程中減少了樣品的收縮及損傷

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缺點(diǎn)：常常使樣品發(fā)生變形收縮

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適用范圍：鑄型或體表比較堅硬的甲殼昆蟲等含水量較少的樣品

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冷凍干燥法

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冷凍干燥法是將經(jīng)過冷凍的樣品置于高真空中，通過升華除去樣品中的水分或脫水劑的過程。冷凍干燥的基礎(chǔ)是冰從樣品中升華，即水分從固態(tài)直接轉(zhuǎn)化為氣態(tài)，不經(jīng)過中間的液態(tài)，不存在氣相和液相之間的表面張力對樣品的作用，從而減輕在干燥過程中對樣品的損傷。

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方法：將含大量水分的生物樣品迅速投入液氮中，使樣品冷凍固化，而后將樣品移入真空鍍膜儀內(nèi)，在高真空狀態(tài)下升華，脫水劑直接由固態(tài)轉(zhuǎn)為氣態(tài)，樣品隨之得到干燥。

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優(yōu)點(diǎn)：不存在氣相與液相間的表面張力問題，故對樣品損傷較小。

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缺點(diǎn)：需特殊的低溫條件，易出現(xiàn)冰晶損傷，費(fèi)時。

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適用范圍：含水量較多的生物樣品

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臨界點(diǎn)干燥法

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臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時，其表面張力等于零的特性，使樣品的液體完全汽化，并以氣體方式排掉，來達(dá)到完全干燥的目的。這樣就可以避免表面張力的影響，較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。此法操作較為方便，所用的時間也不算長，一般約2～3小時即可完成，所以是最為常用的干燥方法。但用此法，需要特殊儀器設(shè)備。

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臨界點(diǎn)干燥是在臨界點(diǎn)干燥儀中進(jìn)行的，操作步驟如下：

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1．固定、脫水：按常規(guī)方法進(jìn)行。如樣品是用乙醇脫水的，在脫水至100%后，要用純丙酮置換15～20分鐘。

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2．轉(zhuǎn)入中間液：由純丙酮轉(zhuǎn)入中間液醋酸異戊酯中，時間約15～30分鐘。

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3．移至樣品室：將樣品從醋酸異戊酯中取出，放入樣品盒，然后移至臨界點(diǎn)干燥儀的樣品室內(nèi)，蓋上蓋并擰緊以防漏氣。

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4．用液體二氧化碳置換醋酸異戊酯：在達(dá)到臨界狀態(tài)(31(C , 72.8大氣壓)后，將溫度再升高10(C，使液體二氧化碳?xì)饣?，然后打開放氣閥門，逐漸排出氣體，樣品即完全干燥。

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莰烯干燥法

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莰烯是一種樟腦類無色結(jié)晶體，能溶于醚、環(huán)乙烷、環(huán)己烯和氯仿中，室溫下呈固體狀，能在較低的溫度下升華，從固態(tài)直接變成氣態(tài)，表面張力小，故經(jīng)它干燥的樣品較松軟，變形小，操作也較簡便。

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莰烯干燥法是由Warrens．Buk于1971年提出的，其操作步驟如下：

1.取新鮮材料迅速投入0．1mol/L磷酸緩沖液中漂洗，然后投入5％的戊二醛(用磷酸緩沖液配制的pH7.4)中固定1h。

2.轉(zhuǎn)至加有5.4％蔗糖的0．1mol/L磷酸緩沖液中，在冷凍溫度下過夜。

3.用l％的四氧化鋨(磷酸緩沖液配制)溶液中固定2h。

4.用磷酸緩沖液或雙蒸水漂洗2～3次，每次、15min。

5.用30％，50％，70％，90％，95％和100％丙酮脫水，每級15min。

6.用100％的苯脫酯。

7.在1：1苯與環(huán)氧丙烷中浸泡15min，再轉(zhuǎn)至純環(huán)氧丙烷中，在45℃下經(jīng)20min后，轉(zhuǎn)入預(yù)先在水浴箱中加溫成液體的莰烯中浸透，取出樣品裝臺。

8.放入真空干燥器中，在室溫下抽真空1h左右，使莰烯直接從固體中升華，然后鍍膜。

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