XtenCHOTM 高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)
?? ? ?簡介：XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)是Atagenix?自主開發(fā)的一套高效表達(dá)蛋白和抗體的瞬時表達(dá)系統(tǒng)，該系統(tǒng)不僅表達(dá)量高（一般為200-400mg/L,?部分抗體的表達(dá)量高達(dá)1g/L），而且工藝簡單，既適用人源化抗體小體積高通量篩選，又適用于大體積的放大生產(chǎn)。?
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? ? ? ? ?重組蛋白在抗原制備、蛋白相互作用、酶學(xué)分析、藥物靶標(biāo)研究等方面應(yīng)用廣泛，選擇合適的重組蛋白表達(dá)方法對于能否及時獲得所需數(shù)量和質(zhì)量的重組蛋白至關(guān)重要。常規(guī)的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)我們并不陌生，主要有原核表達(dá)系統(tǒng)、哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、枯草芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)，各有優(yōu)缺點(diǎn)，其中哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)因其表達(dá)的蛋白更接近天然狀態(tài)，且最容易保留生物活性，而備受關(guān)注，但表達(dá)量通常是一大難題。
? ? ? ? ?臨床及實(shí)驗(yàn)室研究中，經(jīng)常要求在短時間內(nèi)生產(chǎn)一定量的重組蛋白。穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株生產(chǎn)重組蛋白過程繁瑣且周期長；瞬時基因表達(dá)技術(shù)則能在短期內(nèi)高表達(dá)重組蛋白，因而得到廣泛應(yīng)用。隨著生物醫(yī)藥研究技術(shù)的發(fā)展，快速生產(chǎn)毫克到克級別的重組蛋白瞬時表達(dá)體系被廣泛用于新藥篩選和臨床前研究。
1 .XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)簡介
? ? ? ? ?XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)是Atagenix?自主開發(fā)的一套高效表達(dá)蛋白和抗體的瞬時表達(dá)系統(tǒng)，主要包括以下組分：①?XtenCHOTM?cell line；②?ATGfect?solution；③?Basic expression medium/ATGfeed?medium。?該系統(tǒng)不僅表達(dá)量高（一般為200-400mg/L,?部分抗體的表達(dá)量高達(dá)1g/L），而且工藝簡單，既適用人源化抗體小體積高通量篩選，又適用于大體積的放大生產(chǎn)。
2 .XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)勢
①?XtenCHOTM?細(xì)胞是Atagenix?開發(fā)的一種經(jīng)基因改造的重組CHO細(xì)胞株，使用含配套元件的載體，可以使轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞的表達(dá)載體拷貝數(shù)增加，延長游離質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的停留時間，從而使載體攜帶的目的基因獲得高水平，持續(xù)表達(dá)。
② ?XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)改進(jìn)了CHO常規(guī)轉(zhuǎn)染方法，采用新穎的高密度轉(zhuǎn)染方法和特殊的細(xì)胞培養(yǎng)模式，提高了轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞活率，使轉(zhuǎn)染細(xì)胞存活時間從常規(guī)6-7天延長至10-14天，進(jìn)一步提高了目的蛋白的產(chǎn)量。
③?XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染試劑、表達(dá)培養(yǎng)基和補(bǔ)料培養(yǎng)基相較于常用的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑、商業(yè)化CHO?瞬轉(zhuǎn)培養(yǎng)基以及補(bǔ)料培養(yǎng)基，成本大大降低，更適用于工業(yè)生產(chǎn)，在規(guī)模較大的重組蛋白瞬時表達(dá)生產(chǎn)中更能體現(xiàn)其性價比高的特點(diǎn)。
3? .?XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)測試結(jié)果????
3.1 與其它商業(yè)化表達(dá)系統(tǒng)的比較
? ? ? ? ?使用XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)和其它公司的兩個商業(yè)化CHO?瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)CHO Expression system 1?和?CHO Expression system?2?同時對一個抗體進(jìn)行表達(dá)，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞密度和活率監(jiān)測及抗體產(chǎn)量見圖1和圖2：
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3.2 ?不同治療性重組抗體表達(dá)測試
? ? ? ? ? 選取4種典型的治療性重組抗體序列，用XtenCHOTM?高密度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá)測試。?抗體產(chǎn)量見圖3：
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? ? ? ? ? ? ? ? ?Ab1: Pembrolizumad, Ab2:?Utomilumab, Ab3: PF, Ab4: Claudiximab? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
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