? ? ? ?濟南化學檢驗員資格證書這兒考食品化驗員培訓報名-實驗前玻璃儀器的預先處理

一、實驗目的要求

1、?進一步加強學習、掌握玻璃器具等器材的清洗、烘干、包扎的包扎技術。

2、為下一次的課做好器材的準備工作。

二、原理

為確保實驗順利地進行，要求把實驗所用的玻璃器皿清洗干凈。為保持滅菌后和無菌狀態(tài)，需要對培養(yǎng)皿、吸管等進行包扎，對試管和三角瓶等加塞棉塞。這些工作看起來很普通簡單，但如操作不當或不安操作規(guī)定去做，則會影響實驗結果，甚至會導致試驗的失敗。

滅菌原理：高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。適用于一般培養(yǎng)基、玻璃器皿、無菌水、金屬用具。一般培養(yǎng)基在121．3℃滅菌20分鐘即可。干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關，在菌體受熱時，當環(huán)境和細胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝固就越快，反之含水量越小，凝固緩慢。因此，與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度高（160—170℃），時間長（1—2小時）。但干熱滅菌溫度不能超過180℃，否則，包器皿的紙或棉塞就會烤焦，甚至引起燃燒，因而一般塑料制品不能用干熱滅菌。

北京、上海、廣州、深圳、成都、重慶、杭州、西安、武漢、蘇州、鄭州、南京、天津、長沙、東莞、寧波、佛山、合肥、青島、昆明、沈陽、濟南、無錫、廈門、福州、溫州、金華、哈爾濱、大連、貴陽、南寧、泉州、石家莊、長春、南昌、惠州、常州、嘉興、徐州、南通、太原、保定、珠海、中山、蘭州、臨沂、濰坊、煙臺、紹興化妝品廠微生物檢驗員（化妝品微檢員），醫(yī)療器械產(chǎn)品無菌檢驗員，衛(wèi)生消毒用品無菌檢驗員，食品微生物檢驗員，約品微生物檢驗員，水質(zhì)微生物檢驗員等一切涉及微生物檢驗的相關人員，化學檢驗員資格證、考培合格取得微生物檢驗員證書；無菌微生物檢驗員資格證報名基本要求及收費：18-60周歲，高中及以上學歷；初級（五級1800元/人）；中級（四級2000元/人）；高級（2200元/人）含資料、鑒定考核、證書等，合格由職業(yè)技能鑒定評價中心頒發(fā)微生物檢驗員證書，終身有效、聯(lián)網(wǎng)注冊。? ?

常年開展如下項目：

? 1.化妝品檢驗員(微生物檢測員、化妝品包裝材料檢驗、化妝品添加劑檢驗)等職業(yè)培訓;

? 2.食品安全總監(jiān)、食品安全管理師、公共營養(yǎng)師等；

? 3.農(nóng)產(chǎn)品食品檢驗員(農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測員、糧油質(zhì)量檢驗員、食品檢驗員)等職業(yè)資格培訓;

? 4.化學檢驗員(化學檢驗員、化妝品檢驗員、材料物理性能檢驗員、水質(zhì)檢驗員)等職業(yè)資格培訓;

? 5.內(nèi)審員(ISO22716化妝品GMPC內(nèi)審員;ISO22000化妝品安全管理體系內(nèi)審員;ISO9001質(zhì)量管理體系內(nèi)審員;ISO14000環(huán)境管理體系內(nèi)審員;OHSAS18000職業(yè)健康安全管理內(nèi)審員;IATF16949汽車行業(yè)質(zhì)量管理內(nèi)審員;ISO17025實驗室質(zhì)量管理體系內(nèi)審員;ISO13485醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系內(nèi)審員)等內(nèi)審員培訓;

? 6.化妝品檢驗員、微生物檢驗員、醫(yī)療器械檢驗員、衛(wèi)士消毒產(chǎn)品檢驗員；

? 7.計量員、內(nèi)校員、計量管理員、內(nèi)部校驗員、儀校員計量校準員資格證培訓；

? 8、化妝品安全管理員、化妝品安全管理師、化妝品質(zhì)量管理師、公共營養(yǎng)師、營養(yǎng)配餐師、中式烹調(diào)師、健康管理師等化妝品招投標加分證書

? 9、化妝品、化妝品行業(yè)出廠檢驗技能培訓(理化檢驗及微生物檢驗培訓)常年開設。?

（一）儀器

高壓蒸汽滅菌鍋、電熱烘箱、試管、三角瓶、培養(yǎng)皿和吸管、棉線、紗布、棉花、牛皮紙、報紙、硅膠塞等

四、實驗內(nèi)容

（一）?玻璃器皿的清洗：

????????新購的玻璃器皿的洗滌

將器皿放入２％鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，以除去游離的堿性物質(zhì)，最后用流水沖凈。

對容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉(zhuǎn)動容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸，數(shù)分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上晾干，即可使用。

????????常用舊玻璃器皿的洗滌

確實無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用前后，可按常規(guī)用洗衣粉水進行刷洗；

吸取過化學試劑的吸管，先浸泡于清水中，待到一定數(shù)量后再集中進行清洗。

???????帶菌玻璃器皿的洗滌

凡實驗室用過的菌種以及帶有活菌的各種玻璃器皿，必須經(jīng)過高溫滅菌或消毒后才能進行刷洗：

1、帶菌培養(yǎng)皿、試管、三角瓶等物品，做完實驗后放入消毒桶內(nèi)，用0.1MPa滅菌20～30 min后再刷洗。含菌培養(yǎng)皿的滅菌，底蓋要分開放入不同的桶中，再進行高壓滅菌。

2、帶菌的吸管、滴管，使用后不得放在桌子上，立即分別放入盛有3～5%來蘇爾或5%石炭酸或0.25%新潔爾滅溶液的玻璃缸（筒）內(nèi)消毒24h后，再經(jīng)0.1MPa滅菌20 min后，取出沖洗。

3、帶菌載玻片及蓋玻片，使用后不得放在桌子上，立即分別放入盛有3～5%來蘇爾或5%石炭酸或0.25%新潔爾滅溶液的玻璃缸（筒）內(nèi)消毒24h后，用夾子取出經(jīng)清水沖干凈。

如用于細菌染色的載玻片，要放入50g/ L肥皂水中煮沸10min，然后用肥皂水洗，再用清水洗干凈。

????????最后將載玻片浸入95%酒精中片刻，取出用軟布擦干，或晾干，保存?zhèn)溆谩?/p>

若用皂液不能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。

4、含油脂帶菌器材的清洗

單獨高壓滅菌：用0.1MPa滅菌20～30 min→趁熱倒去污物→倒放在鋪有吸水紙的籃子上→用100?℃烘烤0.5h→用5%的碳酸氫鈉水煮兩次→再用肥皂水刷洗干凈。

（二）、玻璃器材的晾干或烘干

不急用的玻璃器材：可放在實驗室中自然晾干；

急用的玻璃器材：把器材放在托盤中（大件的器材可直接放入烘箱中），再放入烘箱內(nèi)，用80～120℃烘干，當溫度下降到60℃以下再打開取出器材使用。

（三）器皿的包扎：

要滅菌后的器皿仍保持無菌狀態(tài)，需在滅菌前進行包扎。

（1）培養(yǎng)皿：洗凈的培養(yǎng)皿烘干后每10套（或根據(jù)需要而定）疊在一起，用牢固的紙卷成一筒，或裝入特制的鐵桶中，然后進行滅菌。

（2）?吸管：洗凈、烘干后的吸管，在吸口的一頭塞入少許脫脂棉花，以防在使用時造成污染。塞入的棉花量要適宜，多余的棉花可用酒精燈火焰燒掉。每支吸管用一條寬約4~5cm的紙條，以30~50℃的角度螺旋形卷起來，吸管的尖端在頭部，另一端用剩余的紙條打成一結，以防散開，標上容量，若干支吸管包扎成一束進行滅菌。使用時，從吸管中間擰斷紙條，抽出試管。

（3）試管和三角瓶：試管和三角瓶都需要做合適的棉塞，棉塞可起過濾作用，避免空氣中的微生物進入容器。制作棉塞時，要求棉花緊貼玻璃壁，沒有皺紋和縫隙，松緊適宜。過緊易擠破管口和不易塞入；過松易掉落和污染。棉塞的長度不小于管口直徑的2倍，約2/3塞進管口。

目前，國內(nèi)已開始采用塑料試管塞，可根據(jù)所用的試管的規(guī)格和試驗要求來選擇和采用合適的塑料試管塞。

若干支試管用繩扎在一起，在棉花部分外包裹油紙或牛皮紙，再用繩扎緊。三角瓶加棉塞后單個用油紙包扎。

（四）、玻璃器材的滅菌

滅菌:干熱滅菌:160～165℃烘箱中滅菌2h；或濕熱滅菌:121?℃?20～30min

????????干熱滅菌法

1、將包扎好的玻璃器皿擺入電熱烘箱中，相互間要留有一定的空隙，以便空氣流通。

2、關緊箱門，打開排氣孔，接上電源。

3、待箱內(nèi)空氣排出到一定程度時，關閉上排氣孔，加熱至滅菌溫度后，固定溫度進行滅菌：160℃—165℃保持2小時。2小時后切斷電源。

4、待烘箱內(nèi)溫度自然降溫冷卻到60℃以下后，再開門取出玻璃器皿，避免由于溫度突然下降而引起玻璃器皿碎裂。

高壓蒸汽滅菌法

1、關好排水閥門，放入純凈水或蒸餾水至標度。注意水量一定要加足，否則容易造成事故。

2、將須要滅菌的器材、培養(yǎng)基等裝入滅菌鍋中，加蓋密封。旋緊螺旋時，先將每個螺旋旋轉(zhuǎn)到一定程度（不要太緊），然后再旋緊相對的兩個螺旋，以達到平衡旋緊，否則易造成漏氣，達不到徹底滅菌的目的。

3、?通電加溫，打開排氣活門，排盡鍋內(nèi)的空氣。通常當壓力表指針升至5磅或0.05MPa時，打開排氣活門放氣，待壓力表指針降至零點一小段時間后，再關閉活門。即活門沖出的全部是蒸汽時則表示徹底，此時可關閉排氣活門，如果過早關閉活門，排氣不徹底，也達不到徹底滅菌的目的。

4、恒溫滅菌: 0.1MPa?或15磅壓力保持20～30分鐘。壓力表的指針上升時，鍋內(nèi)溫度也逐漸升高，當壓力表指針升至0.1MPa時或15磅時，鍋內(nèi)溫度相當于120℃～121℃（等于一個大氣壓），此時開始計算滅菌時間，控制熱源，使處于0.1MPa?或15磅壓力保持20～30分鐘，即能達到完全滅菌的目的，然后停止加溫。當達到所需溫度時開始計時，并在此溫度下保持所需的時間。

5、降溫：自然降溫或打開活門排汽降溫。稍微打開一點排氣活門，使鍋內(nèi)蒸汽緩慢排除，然后逐漸開大活門，氣壓徐徐下降，注意勿使排氣過快，否則會使鍋內(nèi)的培養(yǎng)基沸騰而沖脫或沾染棉花塞，但排氣太慢又使培養(yǎng)基在鍋內(nèi)，受高溫處理時間過長，對培養(yǎng)基也是不利的。一般從排氣到打開鍋蓋以10分鐘左右為好。

6、當鍋內(nèi)蒸汽完全排盡時即壓力表指針降到零時，要立即打開鍋蓋。

7、取出滅菌物品：當鍋內(nèi)溫度下降到60℃左右時器材或培養(yǎng)基。如培養(yǎng)基需制備固體斜面培養(yǎng)基時，則應趁熱將試管斜放在桌上，上面蓋上報紙以免落灰塵，冷卻后便可收起。

8、最后將高壓滅菌器內(nèi)的剩余水排出。

9、觀察滅菌效果。把滅菌培養(yǎng)基放入25℃溫箱中，培養(yǎng)48小時觀察滅菌效果。?48小時后不見雜菌生出，便證明培養(yǎng)基已達到滅菌目的，可以使用。