植物干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
2023-06-28 09:21 作者:bili_98067701618 | 我要投稿
植物干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是利用干細(xì)胞生長(zhǎng)和遺傳特性方面的優(yōu)勢(shì)，在傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，以植物干細(xì)胞為目標(biāo)，誘導(dǎo)、分離和培養(yǎng)外植體，建立相應(yīng)的干細(xì)胞體系。
植物干細(xì)胞培養(yǎng)主要有 3 個(gè)步驟:(1) 從植物中獲得含有形成層的組織:(2) 將含有形成層的組織在培養(yǎng)基中培養(yǎng):(3)從形成層中分離細(xì)胞，從而獲得形成層來源的干細(xì)胞。但根據(jù)目標(biāo)干細(xì)胞的不同，目前主要有 3 種干細(xì)胞培養(yǎng)方法。
1、主要用于木本植物形成層干細(xì)胞的獲得
以植物的新生枝條為外植體，表面滅菌后剝離木質(zhì)部獲得含有形成層、韌皮部、皮質(zhì)和表皮的組織，在分離培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng) 30 d 后，新生的形成層干細(xì)胞與脫分化的愈傷組織分離，將獲得的形成層干細(xì)胞轉(zhuǎn)移到生長(zhǎng)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。本方法可被應(yīng)用于多數(shù)木本植物。目前，紅豆杉和銀杏已經(jīng)成功建立了該類干細(xì)胞培養(yǎng)體系。
2、主要用于草本植物儲(chǔ)藏根形成層干細(xì)胞的獲得
通過對(duì)主根進(jìn)行消毒滅菌，獲得含有形成層的無菌薄片并進(jìn)行高滲處理，使分化組織皮層、韌皮部、木質(zhì)部、髓部等)失去活性，僅保留形成層的活力。轉(zhuǎn)移至誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)至有細(xì)胞長(zhǎng)出,然后將外植體繼代到生長(zhǎng)培養(yǎng)基，培養(yǎng) 10~20 d 后即可分離得到形成層干細(xì)胞，所得干細(xì)胞在同樣的培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)。本方法可被應(yīng)用于大部分具有儲(chǔ)藏根的草本植物，如輪葉黨參、羌活、桔梗、野葛等。目前，人參已經(jīng)成功建立了該類干細(xì)胞培養(yǎng)體系。
3、主要應(yīng)用于植物根部靜止中心干細(xì)胞的獲得
收集無菌苗含有靜止中心的根組織,去掉根冠從切口開始截取 1 mm 長(zhǎng)作為外植體，將外植體放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng) 30 后，靜止中心干細(xì)胞由于與其他根部組織細(xì)胞的不同，兩者自然分離，將獲得的靜止中心干細(xì)胞轉(zhuǎn)移到生長(zhǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)。目前，利用該方法可得到一年生活多年生草本藥用植物的干細(xì)胞系。
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