Dihydroethidium (二氫乙錠，DHE)是一種超氧化物陰離子熒光探針，在細(xì)胞質(zhì)中具有藍(lán)色熒光，二氫乙錠（也稱為氫乙錠）是常用 DNA 染料溴化乙錠的化學(xué)還原形式。Dihydroethidium探針 可用于檢測(cè)活細(xì)胞中的氧化活性，包括吞噬細(xì)胞中的呼吸爆發(fā)。(λEx/λEm=518/616 nm).二氫乙錠在細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)藍(lán)色熒光直至被氧化，然后插入細(xì)胞 DNA 中，使細(xì)胞核染成明亮的熒光紅色。

圖1.Dihydroethidium (二氫乙錠，DHE)分子結(jié)構(gòu)

圖2.基于二氫乙錠和MitoSOX紅氧化的ROS檢測(cè)方法背后的化學(xué)原理。形成乙錠的非特異性氧化比導(dǎo)致形成2-羥基乙錠的超氧陰離子誘導(dǎo)反應(yīng)占主導(dǎo)地位。值得注意的是，兩種氧化副產(chǎn)物都表現(xiàn)出重疊的熒光特性。

Dihydroethidium (二氫乙錠，DHE)分子結(jié)構(gòu)使用案例

圖3. 二氫乙錠用于檢測(cè)肝組織中ROS的產(chǎn)生。

方法：

1.制備每組（5μm厚）的冷凍肝組織切片并與二氫乙錠（7.5mM;30分鐘;37°C;黑暗）孵育。

2.使用熒光顯微鏡（徠卡，德國）觀察切片，并通過定量形態(tài)分析計(jì)算二氫乙錠陽性細(xì)胞的百分比。