第二章骨髓細(xì)胞學(xué)檢測???

涉及骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查（最常用）、骨髓細(xì)胞化學(xué)檢查、骨髓病理學(xué)檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查、細(xì)胞免疫學(xué)表型分析、造血細(xì)胞培養(yǎng)。

掌握：

〇、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的適應(yīng)癥與禁忌癥

適應(yīng)癥：

①外周血細(xì)胞成分及形態(tài)異常。

②不明原因的發(fā)熱，肝、脾、淋巴結(jié)腫大。

③骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增加、血漿蛋白異常、免疫球蛋白異常。

④化療后的療效觀察。

⑤需要骨髓做標(biāo)本的檢查，如骨髓活檢、造血祖細(xì)胞培養(yǎng)、染色體核型分析、微生物及寄生蟲檢查。

禁忌癥：血友病

晚期妊娠者應(yīng)慎重。

一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的方法及內(nèi)容

1、肉眼觀察

2、低倍鏡下觀察

1）先評價涂片質(zhì)量，在選擇理想涂片觀察。

①取材評價：良好的骨髓涂片可見骨髓小粒，鏡下可見骨髓特有的細(xì)胞。

②涂片評價：涂片適當(dāng)?shù)墓撬杵?，鏡下可見有細(xì)胞分散排列、不重疊的區(qū)域。

③染色評價：染色滿意的骨髓涂片，鏡下見細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，整個涂片沒有沉渣。

2）估計骨髓有核細(xì)胞增生程度。

介于兩者之間，增生程度往上提（稀釋）。

3）計數(shù)巨核細(xì)胞數(shù)目

4）特殊細(xì)胞與其他

如轉(zhuǎn)移到骨髓的癌細(xì)胞、大體積的淋巴瘤細(xì)胞、戈謝細(xì)胞、Niemann-Pick細(xì)胞。

5）血液寄生蟲

不明發(fā)熱病人，注意觀察成熟紅細(xì)胞內(nèi)的瘧原蟲病原體、巨噬細(xì)胞內(nèi)的黑熱病原蟲。

3、油浸鏡檢查

4、骨髓象的分析與報告

包括骨髓有核細(xì)胞增生程度；

粒細(xì)胞與有核紅細(xì)胞比例；

粒系統(tǒng)、紅系統(tǒng)（包括成熟紅細(xì)胞）、巨核系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng)、單核系統(tǒng)和其他血細(xì)胞改變。巨核細(xì)胞單獨計數(shù)并描述血小板分布狀態(tài)

?

二、血細(xì)胞發(fā)育過程中形態(tài)演變的一般規(guī)律

1、細(xì)胞體積

胞體逐漸由大變小。但巨核細(xì)胞由小變大，早幼粒細(xì)胞較原始粒細(xì)胞稍大。

大小變化常伴有形態(tài)改變，巨核細(xì)胞、單核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。

2、細(xì)胞質(zhì)

①量：由少逐漸增多，但淋巴細(xì)胞變化不大。

②染色：由深藍(lán)變淺染，甚至淡紅，紅細(xì)胞系最終呈橙紅色。

③顆粒：由無顆粒（原始細(xì)胞）→嗜天青顆粒（早幼粒細(xì)胞）→特異性顆粒（中性、嗜酸性、嗜堿性顆粒）；單核細(xì)胞類似。但幼紅細(xì)胞無顆粒，淋巴細(xì)胞僅NK細(xì)胞有顆粒。

3、細(xì)胞核

①大小：由大變小，由規(guī)則變不規(guī)則，甚至分葉。但巨核細(xì)胞核由小變大；紅細(xì)胞系核變小，核形規(guī)則，成熟后脫核。

②染色質(zhì)：由細(xì)致疏松逐漸變?yōu)榇植凇⒅旅芑蚰蓧K，著色由淺變深。

③核仁：由有到無。

④核膜：由不明顯到明顯。

4、核/質(zhì)比例

由大變小，即由核大質(zhì)少到核小質(zhì)多。巨核細(xì)胞相反。

?

三、血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征 ??熟悉

l? 粒細(xì)胞系統(tǒng)

1）原始粒細(xì)胞：胞核較大，占細(xì)胞的2/3以上。核染色質(zhì)呈淡紫紅色平坦的細(xì)沙粒狀。核仁2~5個，清楚易見。胞質(zhì)量少，呈天藍(lán)色，繞于核周。正常胞質(zhì)內(nèi)無顆粒，稱Ⅰ型原始粒急性髓系白血病的原始粒細(xì)胞可有少量細(xì)小紫紅色顆粒，稱Ⅱ型原始粒細(xì)胞。

2）早幼粒細(xì)胞：胞體較原始粒細(xì)胞大。胞核大。染色質(zhì)開始聚集呈粗粒狀，核仁可見或不清晰。胞質(zhì)量增多，呈略深藍(lán)色，核周的一側(cè)可出現(xiàn)淡染區(qū)域。胞質(zhì)內(nèi)含有大小、形態(tài)和數(shù)目不一、分布不均的紫紅色非特異性嗜天青顆粒。

3）中幼粒細(xì)胞

①中性：胞核橢圓或一側(cè)開始變扁平。染色質(zhì)聚集成粗索狀或小塊狀，紫紅色，核仁消失。胞質(zhì)量相對增多，淡橙紅色，內(nèi)含細(xì)小、分布均勻、淡紫紅色的特異性中性顆粒。

?? 部分細(xì)胞殘余粗大早幼粒細(xì)胞顆粒。

②嗜酸性：胞體大于中性中幼粒細(xì)胞，胞核與中性中幼粒細(xì)胞相似。胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大、均勻、排列緊密橘黃色特異性嗜酸性顆粒。

③嗜堿性：胞體小于中性中幼粒細(xì)胞，胞核與上述細(xì)胞相似，但輪廓不清，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)模糊。胞質(zhì)內(nèi)含數(shù)量不多、大小不一、較粗大、分布散亂的紫黑色特異性嗜堿性顆粒，比較特別的是其顆?？筛采w在細(xì)胞核上。

4）晚幼粒細(xì)胞：胞核明顯凹陷呈腎形。核染色質(zhì)粗糙呈粗塊狀，排列緊密，深紫紅色。胞質(zhì)量多。胞質(zhì)內(nèi)含中性、嗜酸性和嗜堿性特異性顆粒，分別為中性、嗜酸性和嗜堿性晚幼粒細(xì)胞。中性者胞質(zhì)呈淡橙紅色，另兩種著色不清或淡紫色。

5）桿狀核粒細(xì)胞：細(xì)胞呈圓形，直徑10-15μm。胞核狹長，彎曲呈帶狀、條狀、枝桿狀，兩端鈍圓。核染色質(zhì)粗糙呈塊狀，深紫紅色。胞質(zhì)中含特異性顆粒，分別為中性、嗜酸性、嗜堿性桿狀核粒細(xì)胞三種。

6）分葉核粒細(xì)胞

①中性：胞核分葉狀，常分為2-5葉（分3葉者多見），葉與葉之間有一細(xì)絲相連或完全斷開(若為兩絲相連界定為桿狀核)。染色質(zhì)濃集或呈小塊狀，深紫紅色。胞質(zhì)呈淡橙紅色，布滿細(xì)小紫紅色的中性顆粒。

②嗜酸性：胞核多分為近似對稱的兩葉，深紫紅色。胞質(zhì)中充滿密集粗大、大小均勻的橘紅色嗜酸性顆粒，胞質(zhì)著色不清或淡紫色。

③嗜堿性：胞核的分葉由于嗜堿性顆粒的遮蓋，輪廓和結(jié)構(gòu)模糊，深紫紅色。胞質(zhì)中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜堿性顆粒，胞質(zhì)著色不清或淡紫色。

l? 紅細(xì)胞系統(tǒng)

1）原始紅細(xì)胞：細(xì)胞邊緣有時可見偽足或突起。胞核正圓形，約占細(xì)胞的4/5。核染色質(zhì)呈粗糙粒狀，較原始粒細(xì)胞著色深且粗密，紫紅色。暗紫色核仁1～5個。胞質(zhì)量較少，呈不透明的濃厚深藍(lán)色，核周可有淡染區(qū)，胞質(zhì)內(nèi)無顆粒。

2）早幼紅細(xì)胞：胞核正圓形，占細(xì)胞的2/3以上。染色質(zhì)開始凝集成小塊狀，紫紅色，核仁模糊或消失。胞質(zhì)量稍多，呈不透明深藍(lán)色，仍可見偽足或突起及核周淡染區(qū)，無顆粒。

3）中幼紅細(xì)胞：胞核正圓形，約占細(xì)胞的1/2。染色質(zhì)凝集成團(tuán)塊狀或粗索狀，深染紫紅色，似車輪狀排列或邊緣有裂縫感，其間有明顯的淡染區(qū)域。逐漸有血紅蛋白合成，胞質(zhì)藍(lán)色變淡，部分可呈藍(lán)中帶紅的藍(lán)灰色。

4）晚幼紅細(xì)胞：胞核正圓居中，占細(xì)胞的1/2以下。核染色質(zhì)凝聚成大塊狀或固縮成團(tuán)，呈紫褐色或紫黑色。胞質(zhì)量多，呈均勻淡的灰藍(lán)色、灰紫色、灰紅色。

l? 淋巴細(xì)胞系統(tǒng)

1）原始淋巴細(xì)胞：胞核大，圓形或橢圓形，稍偏位。核染色質(zhì)細(xì)致，呈顆粒狀，但較原始粒細(xì)胞稍粗，著色較深，染色質(zhì)在核仁周圍有濃集現(xiàn)象，核膜濃厚而清晰。核仁多為1~2個，小而清楚，呈淡藍(lán)色或無色。胞質(zhì)量少，呈透明、透亮的天藍(lán)色，不含顆粒。

2）幼稚淋巴細(xì)胞

3）淋巴細(xì)胞

①大淋巴細(xì)胞：胞核偏于一側(cè)或著邊。染色質(zhì)常致密呈塊狀，排列均勻，呈深紫紅色。胞質(zhì)豐富，呈透明天藍(lán)色。個別細(xì)胞可有少量大而稀疏的嗜天青顆粒，為淋巴細(xì)胞中的NK細(xì)胞。

②小淋巴細(xì)胞：染色質(zhì)粗糙致密呈大塊狀，紫紅色。胞質(zhì)量極少，有時幾乎不見而似裸核。

l? 漿細(xì)胞系統(tǒng)

1）原始漿細(xì)胞：胞核圓形，占細(xì)胞的2/3以上，核可偏位。核染色質(zhì)呈粗顆粒網(wǎng)狀，紫紅色。核仁2～5個。胞質(zhì)量多，呈深藍(lán)色，不透明，核的一側(cè)可有半圓形淡染區(qū)，不含顆粒。

2）幼稚漿細(xì)胞：胞核圓形，占細(xì)胞的1/2，核偏位明顯。核染色質(zhì)開始聚集，深紫紅色，核仁模糊或消失。胞質(zhì)量多，呈不透明藍(lán)色，近核處淡染區(qū)較大。

3）漿細(xì)胞：核偏位明顯。核染色質(zhì)凝聚成塊，呈條索狀，深紫紅色。胞質(zhì)豐富，呈不透明深藍(lán)色或藍(lán)紫色，核的一側(cè)有較大面積淡染區(qū)，可見小空泡。

l? 單核細(xì)胞系統(tǒng)

1)原始單核細(xì)胞：胞核較大，圓形或橢圓形。核染色質(zhì)纖細(xì)疏松網(wǎng)狀，淡染紫紅色。核仁1-3個，大而清楚。胞質(zhì)豐富，呈淺灰藍(lán)色，半透明毛玻璃樣，邊緣常不整齊，有時可有偽足狀突起，不含顆粒。

2)幼稚單核細(xì)胞：胞核圓形或不規(guī)則形，可有凹陷，切跡，扭曲或折疊。染色質(zhì)仍呈疏松絲網(wǎng)狀，但稍粗，染淡紫紅色。核仁模糊或消失。胞質(zhì)量多，呈灰藍(lán)色，邊緣可有偽足突出，淡紫紅色嗜天青顆粒。

3)單核細(xì)胞：圓形或不規(guī)則形，邊緣常見偽足突出。胞核不規(guī)則、呈腎形、馬蹄形、筆架形、“S”形，并有明顯扭曲折疊。染色質(zhì)疏松，有壓縮感，呈淡紫紅色絲網(wǎng)狀。胞質(zhì)豐富，呈淡灰藍(lán)色或淡粉紅色，淡紫紅色顆粒。

4)巨噬細(xì)胞：單核細(xì)胞出血管壁進(jìn)入組織后轉(zhuǎn)變成巨噬細(xì)胞。胞體大小不一。細(xì)胞呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形。胞核呈圓形、橢圓形、腎形或不規(guī)則形，偏位。核染色質(zhì)粗或疏松、淡染，呈紫紅色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可見核仁或無核仁。胞質(zhì)豐富，呈不透明灰藍(lán)色或藍(lán)色，不含顆粒或少量嗜天青顆粒，常見空泡和已被分解或消化的吞噬物。

l? 巨核細(xì)胞系統(tǒng)

1）原始巨核細(xì)胞：胞質(zhì)不透明深藍(lán)色。

2）幼稚巨核細(xì)胞：胞體明顯增大。胞核開始有分葉，近核處可出現(xiàn)淡藍(lán)色淡染區(qū)，嗜天青顆粒。

3）顆粒型巨核細(xì)胞：胞體明顯增大。胞核明顯增大，分葉不規(guī)則常層疊呈堆集狀。胞質(zhì)極豐富，呈淡紫紅色，其內(nèi)充滿大量細(xì)小紫紅色顆粒，有時可見邊緣處顆粒聚成簇，為血小板前體，但無血小板形成和脫落。

4）產(chǎn)血小板型/成熟型巨核細(xì)胞：胞質(zhì)內(nèi)顆粒顯聚集成簇，周緣部分裂解為血小板而脫落，使細(xì)胞邊緣不完整。其余均與顆粒型核細(xì)胞相同。

5）巨核細(xì)胞裸核：即產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞的胞質(zhì)裂解成血小板完全脫落后，余下的細(xì)胞核。

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四、血細(xì)胞的常見細(xì)胞化學(xué)染色

1、髓過氧化物酶（MPO）染色——胞質(zhì)藍(lán)黑色顆粒

結(jié)果：

胞質(zhì)無藍(lán)黑色顆粒者為陰性；

出現(xiàn)細(xì)小顆粒、分布稀疏者為弱陽性；

顆粒大而密集者為陽性或強陽性。

臨床意義：

主要用于急性白血病類型的鑒別→急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病。

急性髓系白血?。ˋML）的急性粒細(xì)胞白血病——陽性、強陽性。

急性單核細(xì)胞白血病——弱陽性或陰性。

急性粒、單細(xì)胞白血病——陽性、弱陽性、陰性并存

急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）——陰性

2、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色——胞質(zhì)

結(jié)果：

NAP主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞（分葉核及桿狀核）和巨噬細(xì)胞中，其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。

陽性反應(yīng)為胞質(zhì)中出現(xiàn)淺到深的顏色沉淀物，反應(yīng)強度分為5級，即-、+、++、+++、++++。

反應(yīng)結(jié)果以陽性反應(yīng)細(xì)胞百分率和積分值來表示。

血涂片染色后，油浸鏡觀察100個成熟中性粒細(xì)胞，陽性反應(yīng)細(xì)胞所占百分率即為陽性率；對所有陽性反應(yīng)細(xì)胞按反應(yīng)強度分級。將各級所占的百分率乘以級數(shù)，然后相加即為積分值。

參考值：

成人NAP陽性率10%~40%；積分值40~80分。

?? 應(yīng)建立本實驗室的參考值。

臨床意義：

1）感染性疾病：細(xì)菌性感染時NAP活性明顯增高，病毒性感染時其活性在正常范圍或略減低。

2）鑒別診斷的參考

①慢性髓系白血病的NAP活性明顯減低，積分值常為0。

細(xì)菌感染引起的類白血病反應(yīng)的NAP活性極度增高。

②急性粒細(xì)胞白血病時NAP積分值減低，急性淋巴細(xì)胞白血病的NAP積分值多增高，急性單核細(xì)胞白血病時一般正?；驕p低。

③再生障礙性貧血時NAP活性增高，陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥時活性減低。

3）其他血液病：慢性淋巴細(xì)胞白血病、骨髓增殖性腫瘤（真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥、骨髓纖維化癥）NAP活性中度增高。

4）腺垂體或腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)，應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、ACTH、雌激素等NAP積分值可增高。

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3、氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（AS-D NCE）——胞質(zhì)紅色沉淀

也稱特異性酯酶、粒細(xì)胞酯酶——主要存在于粒系細(xì)胞中。

結(jié)果：

胞質(zhì)中出現(xiàn)紅色沉淀者為陽性反應(yīng)。

原始粒細(xì)胞為陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)，自早幼粒細(xì)胞至成熟中性粒細(xì)胞均呈陽性反應(yīng)，早幼粒細(xì)胞呈強陽性反應(yīng)，酶活性隨細(xì)胞的成熟而逐漸減弱。

嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞、幼紅細(xì)胞——陰性反應(yīng)。

臨床意義：

急性粒細(xì)胞白血病呈強陽性反應(yīng)，急性單核細(xì)胞白血病及急性淋巴細(xì)胞白血病均呈陰性反應(yīng)。

急性粒、單核細(xì)胞白血病呈陽性反應(yīng)、陰性反應(yīng)共存。

4、糖原染色——胞質(zhì)紫紅色化合物

也稱過碘酸希夫反應(yīng)（PAS反應(yīng)）。

結(jié)果：

胞質(zhì)中出現(xiàn)紅色者（顆粒、小塊或彌散均勻紅色）為陽性反應(yīng)

?? 強陽性、陽性、弱陽性和陰性。

①粒系細(xì)胞中原始粒細(xì)胞為陰性反應(yīng)，自早幼粒細(xì)胞至中性分葉核粒細(xì)胞均呈陽性反應(yīng)，并隨細(xì)胞的成熟，陽性反應(yīng)程度漸增強。

②巨核細(xì)胞和血小板均呈陽性反應(yīng)，且巨核細(xì)胞的陽性反應(yīng)程度隨細(xì)胞的發(fā)育成熟而增強。

③單核細(xì)胞呈弱陽性反應(yīng)。

④淋巴細(xì)胞大多呈陰性反應(yīng)，少數(shù)弱陽性。

⑤幼紅細(xì)胞和紅細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。

臨床意義：

1）純紅白血病時病理性幼紅細(xì)胞呈強陽性反應(yīng)，有助于與其他良性紅細(xì)胞疾病的鑒別。

2）PAS反應(yīng)對三種急性白血病類型的鑒別有價值。

急性粒細(xì)胞白血?。涸剂＜?xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)，陽性反應(yīng)物質(zhì)呈細(xì)顆粒狀或均勻淡紅色；

急性淋巴細(xì)胞白血?。涸己陀字闪馨图?xì)胞常呈陽性反應(yīng)，陽性反應(yīng)物質(zhì)呈粗顆粒狀或塊狀；急性單核細(xì)胞白血?。涸?、幼稚單核細(xì)胞大多為陽性反應(yīng)，呈彌散均勻紅色或細(xì)顆粒狀。

3）其他：巨核細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，有助于識別不典型巨核細(xì)胞。

骨髓轉(zhuǎn)移的腺癌細(xì)胞PAS呈強陽性。

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5、鐵染色/普魯士藍(lán)反應(yīng)——含鐵部位有藍(lán)綠色沉淀

人體內(nèi)的鐵的貯存形式：

①骨髓中的單核-巨噬細(xì)胞胞質(zhì)鐵蛋白和含鐵血黃素。

②幼紅細(xì)胞線粒體中含有亞鐵血紅素。

結(jié)果：

1）細(xì)胞外鐵 即幼紅細(xì)胞外的鐵

陽性反應(yīng)為骨髓小粒上見到藍(lán)綠色均勻的無形物質(zhì)，或藍(lán)綠色的小珠狀、粗顆粒狀或藍(lán)黑色的小塊物質(zhì)，按陽性反應(yīng)的強度分為5級：

“-”骨髓小粒無藍(lán)綠色顯現(xiàn)（提示骨髓貯存鐵缺乏）。

“+”有少量鐵顆粒，或偶見鐵小珠。

“++”有較多的鐵顆粒和鐵小珠。

“+++”有很多鐵顆粒、小珠和少數(shù)藍(lán)綠色小塊。

“++++”有極多的鐵顆粒和小珠，并有很多密集成堆的小塊。

2）細(xì)胞內(nèi)鐵 即幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵。

含有鐵顆粒的幼紅細(xì)胞稱為鐵粒幼紅細(xì)胞。

正常幼紅細(xì)胞（晚幼紅細(xì)胞為主）核周可見到1~5個藍(lán)綠色細(xì)小鐵顆粒。

油浸鏡下連續(xù)計數(shù)100個幼紅細(xì)胞，記錄鐵粒幼細(xì)胞所占的百分率。

?? 如含藍(lán)綠色鐵粒≥5個，并環(huán)繞細(xì)胞核排列≥1/3周者，稱環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞。

參考值：

細(xì)胞外鐵+~++，大多為++。

細(xì)胞內(nèi)鐵20%～90%，平均值為65%，無環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞。

臨床意義：

1）缺鐵性貧血，細(xì)胞外鐵呈“-” ，鐵粒幼細(xì)胞百分率減低。

鐵劑治療，細(xì)胞內(nèi)鐵數(shù)天即可糾正，但細(xì)胞外鐵需補鐵治療一段時間后才會出現(xiàn)。

鐵染色是目前診斷缺鐵性貧血及指導(dǎo)鐵劑治療的一項可靠和臨床實用的檢驗方法。

2）非缺鐵性貧血，細(xì)胞外鐵多增加。

?? 慢性炎癥性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、巨幼細(xì)胞貧血、再生障礙性貧血及骨髓病性貧血。

3）鐵粒幼細(xì)胞性貧血，鐵粒幼紅細(xì)胞增多，可見到環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞（＞15%）。

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了解：

一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用

1、診斷造血系統(tǒng)疾病

2、輔助診斷某些疾病

3、提高某些疾病的診斷率

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二、血細(xì)胞的常見細(xì)胞化學(xué)染色

1、α-乙酸萘酚酯酶染色（αNAE）——胞質(zhì)有色沉淀

也稱非特異性酯酶、單核細(xì)胞型酯酶——主要存在于單核系細(xì)胞

結(jié)果：

胞質(zhì)中出現(xiàn)有色沉淀者（灰黑色或棕黑色）為陽性反應(yīng)。

原始單核細(xì)胞為陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)，幼稚單核細(xì)胞和單核細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。

粒系細(xì)胞一般為陰性或弱陽性反應(yīng)。

淋巴細(xì)胞一般為陰性反應(yīng)。

臨床意義：主要用于急性單核細(xì)胞白血病與急性粒細(xì)胞白血病的鑒別

急性單核細(xì)胞白血病呈陽性或強陽性反應(yīng)。

?? 但單核細(xì)胞中的酶活性可被氟化鈉抑制，故常同時做氟化鈉抑制試驗。

急性粒細(xì)胞白血病呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)，其陽性不被氟化鈉抑制。

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三、細(xì)胞免疫分型

單抗、抗原特異性結(jié)合。

1、檢測方法

1）免疫熒光法

有熒光——陽性

無熒光——陰性

2）免疫酶標(biāo)染色法

APAAP（堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶）

顯示顏色——陽性

無顏色——陰性

2、細(xì)胞免疫分型的臨床應(yīng)用

1）有助于識別不同系列的細(xì)胞。

識別髓系細(xì)胞的抗體：CD11b、CD11c、CD13、CD14、CD15、CD33、CD64、CD117。

識別T細(xì)胞系列的抗體：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD57。

識別B細(xì)胞系列的抗體：CD10、CD19、CD20、CD22、CD23、FMC7、CD79a、IgM、Kappa和Lambda輕鏈。

識別NK細(xì)胞的抗體：CD16、CD56。

識別巨核細(xì)胞和血小板的抗體：CD41、CD42、CD61。

識別幼稚紅細(xì)胞的抗體：血型糖蛋白A（CD235a）、CD36、CD71。

2）用于檢測T淋巴細(xì)胞亞群

常用CD3、CD4和CD8單抗檢測全T細(xì)胞，并可將T細(xì)胞分為Th和Ts兩個主要亞群。

3）用于識別不同分化階段的細(xì)胞

CD34、CD38、HLA-DR、TdT

4）有助于識別不同功能態(tài)的細(xì)胞

Tm高表達(dá)CD45RO、不表達(dá)CD45RA。

活化T細(xì)胞不表達(dá)CD45RA。

5）可用于血液腫瘤的免疫表型。

6）可用于血液腫瘤微小殘留病的監(jiān)測。

3、急性白血病細(xì)胞免疫表型特征

1）急性B淋巴細(xì)胞白血病/淋巴母細(xì)胞淋巴瘤（B-ALL/B-LBL）

2）急性T淋巴細(xì)胞白血病/淋巴母細(xì)胞淋巴瘤（T-ALL/LBL）

3）急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）

?

四、細(xì)胞遺傳學(xué)分析

平衡畸變：

t（8；21）（q22;q22）見于一些AML。

t(15;17)(q22;q12)見于急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL），形成PML-RARA融合基因——特異性分子標(biāo)志物。

非平衡畸變：染色體數(shù)目異常。

慢性髓系白血?。–ML）特點是具有Ph染色體，即t(9;22)(q34;q11.2)，形成bcr-abl融合基因。