Hoechst33342染色液
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低,生物實(shí)驗(yàn)中常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33342也用于普通的細(xì)胞核染色、DNA染色。Hoechst 33342的激發(fā)波長為346nm,發(fā)射波長為460nm,Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,激發(fā)波長為352nm, 發(fā)射波長為461nm。
Hoechst33342染色液 產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
Hoechst33342染色液(含封片劑):Hoechst 33342也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342。
分子式為C27H28N6O·3HCl·3H2O,
分子量為615.99,
CAS Number 23491-52-3。
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低,生物實(shí)驗(yàn)中常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33342也用于普通的細(xì)胞核染色、DNA染色。Hoechst 33342的激發(fā)波長為346nm,發(fā)射波長為460nm,Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,激發(fā)波長為352nm, 發(fā)射波長為461nm。
自備材料: 熒光顯微鏡 蒸餾水 微量移液器 PBS或生理鹽水
操作步驟(僅供參考):
(一)固定的組織細(xì)胞染色
1、對于細(xì)胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色,如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。對于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst33342染色液(含封片劑),覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst33342染色液(含封片劑),充分混勻。
2、室溫放置5~8min。
3、輕輕吸除Hoechst33342染色液(含封片劑)。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。
5、無需封片,直接在熒光顯微鏡下觀察。
(二)活細(xì)胞染色
1、取96、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài),按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例,加入適當(dāng)?shù)腍oechst 33342染色液,染液必須充分覆蓋住細(xì)胞。
2、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20~30min。
3、輕輕吸取Hoechst33342染色液(含封片劑)。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。
5、無需封片,直接在熒光顯微鏡下觀察。 染色結(jié)果:細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。 注意事項(xiàng): Hoechst33342染色液(含封片劑)的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要。 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測。 避免反復(fù)凍融,否則容易失效。 Hoechst 33342對人體有刺激性,請注意適當(dāng)防護(hù)。 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期: 6個(gè)月有效。
BIOFOUNT Hoechst33342染色液(含封片劑)可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,無需封片操作。