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多肽同位素標(biāo)記的介紹及應(yīng)用

2023-02-26 14:12 作者:多肽研究員一枚  | 我要投稿

隨著多肽在生物醫(yī)藥領(lǐng)域越來越廣泛和深入的應(yīng)用,多肽標(biāo)記和修飾性的需求和以前相比多出很多,并且對于質(zhì)量要求也在不斷上升,多肽的穩(wěn)定同位素標(biāo)記就是其中典型的一種。

同位素指具有相同原子序數(shù),但質(zhì)量數(shù)不同,亦即中子數(shù)不同的一組核素。如果某同位素能夠自發(fā)地從原子核內(nèi)部放出粒子或射線,同時釋放出能量,稱為放射性同位素。如H3、C13、P32、S35等。放射性同位素的原子核很不穩(wěn)定,會不間斷地、自發(fā)地放射出α射線或β射線或γ射線等,直至變成另一種穩(wěn)定同位素,即無放射性。同位素分為放射性同位素和穩(wěn)定同位素。

運(yùn)用同位素標(biāo)記示蹤法,可以實(shí)現(xiàn)對多肽類代謝途徑研究。被同位素標(biāo)記過后可以隨時追蹤多肽在體內(nèi)或體外位置以及數(shù)量的變化,通過被同位素標(biāo)記的多肽隨著時間變化,在體內(nèi)隨之變化的情況,以此來表現(xiàn)出生物體的生理生化情況。

同位素標(biāo)記示蹤法具有高靈敏度、定位簡單、定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。使得多肽的同位素修飾技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物化學(xué)等領(lǐng)域得到的關(guān)注也隨著上升。因?yàn)槎嚯耐凰貥?biāo)記使用的是穩(wěn)定同位素(如N15,C13)標(biāo)記,所以不能用自顯影等技術(shù)來顯現(xiàn)、追蹤同位素去向;只能用測量分子質(zhì)量或離心技術(shù)來區(qū)別同位素,通過質(zhì)譜儀,氣相層析儀,核磁共振等質(zhì)量分析儀器來測定。


現(xiàn)階段合成的同位素標(biāo)記多肽主要為C13,N15兩種同位素(穩(wěn)定同位素)標(biāo)記的多肽。通過直接在多肽合成過程中引入被同位素標(biāo)記的氨基酸,以此達(dá)到標(biāo)記整條肽鏈的目的。目前不是所有氨基酸都會做同位素標(biāo)記,我們常用的同位素標(biāo)記的氨基酸有酪氨酸(Tyr),蘇氨酸(Thr),賴氨酸(Lys),精氨酸(Arg),谷氨酸(Glu)等。

同位素標(biāo)記的多肽與普通肽的區(qū)別在于其結(jié)構(gòu)中某一個或幾個氨基酸中的C被C13取代或者N被N15取代。因?yàn)橥凰貥?biāo)記多肽的原料(同位素標(biāo)記的氨基酸)價格比普通的貴,使得合成成本也隨之變高,這就直接導(dǎo)致了這種多肽價格的比普通的多肽要高一些。

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