關(guān)于細(xì)胞分離技術(shù)的方法和材料，前面都已經(jīng)詳細(xì)闡述過(guò)了，還有一個(gè)細(xì)胞釋放程序沒(méi)有講，接下來(lái)一起看看艾美捷worthington方法和材料之細(xì)胞釋放程序。

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為了將單層培養(yǎng)中的細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)移或傳遞到另一個(gè)培養(yǎng)容器，有必要將細(xì)胞從單層釋放到懸浮液中，以便可以通過(guò)移液和稀釋輕松處理它們。

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從單層釋放細(xì)胞幾乎總是使用純化的胰蛋白酶通過(guò)稱(chēng)為胰蛋白酶化的過(guò)程來(lái)完成。通常的胰蛋白酶消化過(guò)程在下面的插圖中進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明。

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艾美捷worthington胰蛋白酶消化程序：

1.從細(xì)胞中去除培養(yǎng)基。

2.添加無(wú)菌胰蛋白酶溶液（在?BSS?平衡鹽溶液中，通常不含鈣的?Hanks。

3.讓胰蛋白酶溶液在室溫或?37°C（或?4°C?更長(zhǎng)時(shí)間）下作用于單層幾分鐘。

4.輕輕去除胰蛋白酶溶液，以免干擾細(xì)胞。

5.添加?BSS?或培養(yǎng)基（通常含有血清或胰蛋白酶抑制劑以滅活殘留的胰蛋白酶）并攪拌容器以破壞單層細(xì)胞并懸浮細(xì)胞。

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一些研究人員發(fā)現(xiàn)，使用結(jié)晶胰蛋白酶的程序可以提高細(xì)胞釋放后的活力。活力通常通過(guò)測(cè)量克隆效率來(lái)確定，即單個(gè)細(xì)胞附著在培養(yǎng)容器壁上并分裂產(chǎn)生染色后肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞集落的能力。

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艾美捷worthington胰蛋白酶的應(yīng)用：

組織解離，尤其是與其他酶如膠原酶和彈性蛋白酶結(jié)合時(shí)

通過(guò)“胰蛋白酶消化”收獲細(xì)胞

線粒體分離

蛋白質(zhì)的體外研究

從塑料和玻璃中去除單層細(xì)胞

各種血凝程序

流式細(xì)胞儀?DNA?分析的樣品制備

胰蛋白酶圖譜

指紋和測(cè)序工作

環(huán)境監(jiān)測(cè)

降低組織培養(yǎng)中的細(xì)胞密度

傳代細(xì)胞

切割融合蛋白

從純化的糖蛋白中產(chǎn)生糖肽

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Worthington專(zhuān)注于高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。其核心酶產(chǎn)品包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。