OLINK蛋白檢測服務樣本準備指南(血清/血漿)

血清樣本準備
1.收集全血到血清采集試管中;
2.讓血液在室溫下凝固,通常需要 15-30 分鐘。注意放置不宜超過 60 分鐘,凝結的細胞有可能開始溶解;
3.在制冷離心機(2-8°C)中以 1000-2000 x g 離心 10 分鐘,以去除血塊;
4.立即將血清轉移到干凈的管中,分裝至材質有保障的EP管(≥100ul/管);
5.儲存在 -80℃。
血漿樣本準備
1. 收集全血到市售的抗凝劑處理采集管內(經 EDTA,檸檬酸或肝素處理),注意所有樣本應使用同一種采集管;
2. 在制冷離心機(2-8°C)中以 1000-2000 x g 離心 10 分鐘,以去除血漿中的細胞;
3.立即將血漿轉移到干凈的管中,并分裝至材質有保障的Ep管中(≥100ul/管);
4.儲存在 -80℃。
注意:
1.實驗樣本需包含無細胞的空白培養(yǎng)基
2.如果任何蛋白質預期是高誘導表達的,實驗室會對樣品做至少包括兩個濃度梯度稀釋,以檢測任何可能的濃度。
注意事項說明
采樣程序的標準化很重要。 任何分析的關鍵是病例和對照樣本在從研究設計和樣本收集到數(shù)據(jù)分析的整個分析過程中得到一致處理。以下是幾個會產生影響的因素,準備樣本時需要注意:
溫度:溫度是蛋白質處理中的主要影響因素。血漿樣本在離心分離前室溫(22℃)放置不應超過 1 小時,4°C 放置不應超過 8 小時。樣品之間的預離心延遲時間應保持較短且一致,以避免影響;
溶血:在大多數(shù)情況下,溶血是一種不可避免的分析前效應。 它可能是由于血液樣本收集過程中使用的程序以及運輸條件和樣本制備造成的,需要盡量規(guī)避。
凍融:長期保存需保障樣本保存在-80℃或更低,如中途凍融應保障每個樣本的凍融情況一致,以避免不同凍融次數(shù)引入的樣本差異,生物庫應提供每個樣本的完整數(shù)據(jù)跟蹤,避免無謂的凍融。
一致性:同一項目中的樣本類型應保持一致,以使數(shù)據(jù)具有可比性;同一項目應使用同一種類型采血管;樣本采集操作應盡量一致,如血清樣本凝固時間、血漿樣本離心條件等;樣本儲存條件應盡量一致,如溫度、時間、凍融次數(shù)(盡量避免)等。
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