關(guān)于突變？

所有突變都包含DNA序列的改變。

突變率？

每代發(fā)生突變的數(shù)量，根據(jù)觀察單元的層次，可分為基因組突變率，基因座突變率，堿基突變率。舉個(gè)栗子，細(xì)菌基因組的突變率是每代3×10-3。

突變類型？

1、根據(jù)突變發(fā)生性質(zhì)，可分為自發(fā)突變和誘發(fā)突變，自發(fā)突變是由于正常的細(xì)胞活動(dòng)或細(xì)胞與環(huán)境的隨機(jī)相互作用產(chǎn)生的本底突變，在自然群體中屬于稀有事件，并且大多數(shù)能破壞基因的突變?cè)谶M(jìn)化過程中會(huì)被淘汰。使用某些特定化合物或特定條件可以增加突變發(fā)生率，該種突變稱為誘發(fā)突變，應(yīng)用誘變劑，使得在任何基因中引入一些突變都成為可能。

2、根據(jù)DNA序列變化方式，分為點(diǎn)突變和插入/缺失序列突變；

3、根據(jù)突變后功能變化，分為隱性突變（也稱為喪失功能的突變、無效突變）、顯性突變（也稱為獲得功能的突變）、滲漏突變（功能受到部分影響）、沉默突變（對(duì)表型無影響的突變）

什么是移碼突變?

1、密碼子(codon)：遺傳密碼以三個(gè)核苷酸（三聯(lián)體）為單位解讀，每一組代表一種氨基酸，即每三個(gè)核苷酸序列成為一個(gè)密碼子。

2、可讀框（ORF)：一個(gè)由能翻譯成氨基酸的三聯(lián)體構(gòu)成的閱讀框稱為可讀框（ORF)。一個(gè)基因包括一系列密碼子，從5’端的起始密碼子往3’端的終止密碼子解讀，氨基酸序列即為N端到C端。

3、移碼（frameshift)：在一段編碼序列中，缺失或插入了一個(gè)堿基的突變將會(huì)改變整個(gè)閱讀框，這種改變稱為移碼突變。移碼后的整個(gè)氨基酸序列都會(huì)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)可能會(huì)完全失去功能。

如果遺傳密碼是不重疊的三聯(lián)體，根據(jù)起始位點(diǎn)的不同，會(huì)有三種可能的方式將核苷酸翻譯成蛋白質(zhì)，比如序列

A C G A C G A C G A C G A C G A C G

它可能的閱讀框是

ACG ACG ACG ACG ACG ACG

CGA CGA CGA CGA CGA CGA

GAC GAC GAC GAC GAC GAC

當(dāng)獲得一條未知功能的DNA序列后，就可以根據(jù)密碼子表分析三個(gè)閱讀框是被阻斷還是開放的，在任何一段DNA序列中，通常不會(huì)超過一個(gè)閱讀框是開放的，即一段DNA序列中只有一種閱讀框是可翻譯的，因?yàn)槠渌拈喿x框被頻繁出現(xiàn)的終止密碼子所阻斷。

溫馨提醒：在cDNA文庫構(gòu)建過程中，由于反轉(zhuǎn)錄的結(jié)束位置無法人為控制，即外源cDNA轉(zhuǎn)錄翻譯的起始位點(diǎn)無法人為控制，建庫過程中一般會(huì)使用三框型接頭，以確保所有cDNA都有被正確翻譯讀碼的機(jī)會(huì)，理論上不可避免的會(huì)存在2/3的序列是移碼的。

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