基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn) 3 - 實(shí)驗(yàn)一模擬(中翻):Experimental Design 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

本期是實(shí)驗(yàn)一的模擬部分(中文),內(nèi)容是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):Ex-P藥物是否是導(dǎo)致腎損傷的原因?
本部分內(nèi)容來自 University of California, Berkeley - UC Berkeley Extension, 虛擬實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容來自 Labster. 本部分內(nèi)容均不會(huì)標(biāo)記為為原創(chuàng),但由于是UP主購買的課程,因此不接受非授權(quán)的轉(zhuǎn)載,謝謝您的理解。
每一個(gè)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)均會(huì)分為三部分:第一部分為實(shí)驗(yàn)的生物理論;第二部分為實(shí)驗(yàn)的指導(dǎo)手冊;第三部分為 Labster?的虛擬實(shí)驗(yàn)?zāi)M。第一部分的基本信息由 Ying Liu, Ph.D. 提供,第二部分的實(shí)驗(yàn)手冊來自 Labster, 第三部分的實(shí)驗(yàn)?zāi)M過程由UP主操作。
本期的模擬過程會(huì)包括虛擬實(shí)驗(yàn)室的圖片以及UP主的中文。
文中的第一人稱是AI機(jī)器人 Dr. One.
先是背景介紹:
Dr. One 說最近有不少腎病患者,機(jī)器人懷疑一種名為Ex-P的藥物導(dǎo)致了這種腎損傷。不懂英文的可以跳過前面這幾張圖。









也就是說,這個(gè)機(jī)器人懷疑這個(gè)名為Ex-P的藥物導(dǎo)致了這種腎損傷。Ex-P含有三種物質(zhì),其中的每一種都不能單獨(dú)造成健康問題。
接著,穿上白大褂帶上手套。

接下來是顯微鏡觀察。









我們剛剛完成了“觀察”,現(xiàn)在開始提出問題:







將物質(zhì)A、B、C分別加入不同的試管后,分別再加入緩沖劑,獲得物質(zhì)A、B、C的血漿溶液。


現(xiàn)在將三種(ABC)血漿溶液一起用吸管/移液器加入到一個(gè)腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)板中:




將其放入恒溫箱:

等待恒溫箱慢慢培養(yǎng)??偨Y(jié)一下:

恒溫箱的溫度、時(shí)間及其它固定條件就是控制變量。
培養(yǎng)好了,取出來觀察觀察:

熒光顯微鏡:可以回顧上期,看不懂英文的朋友就別去看了。熒光顯微鏡簡單來說可以看到熒光染色。在本次實(shí)驗(yàn)中,熒光染色可以進(jìn)入已經(jīng)死亡的細(xì)胞,因?yàn)樗劳龅募?xì)胞的細(xì)胞膜已經(jīng)不具備保護(hù)隔離的功能。我們剛剛培養(yǎng)的細(xì)胞還沒有染色,因此在熒光顯微鏡下應(yīng)當(dāng)看不出細(xì)胞的區(qū)別。

因此我們現(xiàn)在來給細(xì)胞染色再觀察。


等待15分鐘,讓多聚甲醛充分反應(yīng)。之后用PBS緩沖液來清洗培養(yǎng)的細(xì)胞以獲得更好的成像。




之后,吸出熒光染料并倒入液體廢物瓶中,再次用PBS緩沖劑清洗培養(yǎng)細(xì)胞。
現(xiàn)在再放在熒光顯微鏡下觀察:


實(shí)驗(yàn)對照:


實(shí)驗(yàn)樣品:腎上皮細(xì)胞 + 加入物質(zhì)A、B、C(來自Ex-P)的血漿溶液,與之前的培養(yǎng)一致。
陰性對照:腎上皮細(xì)胞 + 緩沖劑:不造成刻意的腎損傷。
陽性對照:腎上皮細(xì)胞 +?紅色物質(zhì)X,確定造成腎損傷。

從恒溫箱中取出后,再對它們進(jìn)行染色。
我們的期待應(yīng)該是:
陰性對照:沒有大量細(xì)胞被染色;
陽性對照:有細(xì)胞死亡且被染色。
如果在陰性對照中發(fā)現(xiàn)大量染色細(xì)胞,則意味著實(shí)驗(yàn)是有缺陷的。
陰性對照結(jié)果:

陽性對照結(jié)果:

實(shí)驗(yàn)樣品結(jié)果:

實(shí)驗(yàn)做完了,現(xiàn)在你被叫去開會(huì):

他們問了你幾個(gè)問題:
1. 你的結(jié)果是什么?
2. 你的結(jié)果可靠嗎?

“看起來” - 看來這一結(jié)果還不夠確鑿。怎么樣才能證明Ex-P的問題呢?

最后一個(gè)問題:當(dāng)你重復(fù)實(shí)驗(yàn)之后,你需要怎么做?

好啦!本次實(shí)驗(yàn)?zāi)M就到此結(jié)束啦!希望大家喜歡!也請大家多多給我反饋喔!