BODIPY 581/591 C11（脂質(zhì)過氧化傳感器）是脂質(zhì)氧化 (lipid oxidation) 的熒光比值探針，可用于檢測細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜中的活性氧 (ROS)。染料的多不飽和丁間二烯基氧化后會導(dǎo)致熒光發(fā)射峰從 ～590 nm 偏移至 ～510 nm。BODIPY581/591 是一種用于鐵死亡研究的常用產(chǎn)品。

溶解度Solubility Soluble in DMSO；DMSO : 30 mg/mL

性狀：Solid powder

儲藏條件：Dry, dark and store at 0-4℃ for short term (days to weeks) or -20℃ for long term (Store correctly 2-3years).

BODIPY581/591 C11熒光圖譜：

BODIPY581/591 C11 使用方法（活細(xì)胞成像分析）

1、染色工作液的準(zhǔn)備

1.1 儲存液的制備：將低溫保存的 C11 BODIPY 581/591 干粉從冰箱取出后置于室溫至少 20min，低速離心后，加入高質(zhì)量 DMSO 配制成適宜濃度的儲存液，比如：10mM 儲存液（即：往 1mg C11 BODIPY 581/591加入 198μl DMSO，充分溶解后混勻即可），根據(jù)單次用量分裝，≤-20℃保存，盡量避免反復(fù)凍融。

1.2 工作液的制備：C11 BODIPY 581/591 用于活細(xì)胞染色的建議工作濃度一般是 1-10 μM，請根據(jù)細(xì)胞類型和實驗?zāi)康?，參閱文獻(xiàn)，再根據(jù)實際應(yīng)用摸索最佳工作濃度。用培養(yǎng)基或生理緩沖液稀釋 10mM 儲存液到所需的工作濃度，現(xiàn)配現(xiàn)用！

2. 染色步驟

2.1 細(xì)胞鋪板，37℃孵育過夜；

2.2 用待研究藥物處理細(xì)胞；

2.3 加入一定量的 10mM C11 BODIPY 581/591 儲存液使其終濃度為 10μM。（或開始做實驗做下濃度優(yōu)化，測定幾個濃度梯度）。37℃孵育 30min。

2.4 吸走培養(yǎng)基，用 PBS 清洗三次；

2.5 熒光顯微鏡測定熒光。還原態(tài)染料用 Ex/Em=581/591nm（Texas Red 濾片）；氧化態(tài)染料用Ex/Em=488/510nm（FITC 濾片）來測定。

2.6 590m/510nm 發(fā)射光下測定的熒光讀數(shù)比值反映細(xì)胞脂質(zhì)過氧化水平。

3. 圖像處理和分析

分別使用傳統(tǒng)的 Texas Red(590nm)和 FITC（510nm）發(fā)射濾片來進(jìn)行熒光成像。

通過定量熒光強(qiáng)度和計算分別在 Texas Red(590nm)和 FITC（510nm）通道下測定熒光得比值來反映過氧化水平。