我們干貨欄目前面已經(jīng)給大家介紹了自噬相關(guān)主題內(nèi)容：經(jīng)典自噬、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬、線粒體自噬和分子伴侶自噬（點擊跳轉(zhuǎn)文章），本期小編將給大家介紹一下假病毒，了解假病毒的概念、應(yīng)用，以及用假病毒做標準品的優(yōu)勢。?

假病毒（pseudovirus)是由病毒的衣殼蛋白或者包膜蛋白包裹攜帶特定序列異源核酸形成的類似于真病毒且具有感染性的病毒顆粒，但被包裹的核酸因不具復(fù)制形成病毒的全部核酸序列的能力，所以其僅有一輪的感染力，操作非常之安全。

假病毒的應(yīng)用領(lǐng)域也非常之廣泛

基因表達調(diào)控：科研工作者們利用它具有真病毒一樣的感染能力，來進行基因遞送，實現(xiàn)在細胞和動物器官中的目的基因調(diào)控——雖然病毒感染細胞后不能在復(fù)制產(chǎn)生新的病毒 ，但是他所攜帶的表達單元卻可以在細胞中利用細胞自身的表達系統(tǒng)進行轉(zhuǎn)錄翻譯，從而實現(xiàn)基因的表達調(diào)控。

真核抗體研究：2021年科學家們構(gòu)建出刺突蛋白缺失13個氨基酸的SARS-CoV-2假病毒SΔCT13，通過研究發(fā)現(xiàn)SΔCT13假病毒刺突蛋白截斷之后可提高病毒進入細胞的能力，病證實該病毒適用于開發(fā)SARS-CoV-2假病毒中和試驗方法。

假病毒與核酸診斷：分子診斷的發(fā)展日新月異， 隨著臨床上對病毒性傳染病、 婦女健康等病原體分子檢驗項目的認識不斷深入， 檢測需求不斷多樣， 不僅需要對病原體核酸進行定性和分型檢測， 對病原體核糖核酸定量的準確性、 精確程度的要求也越來越高。

假病毒在檢測領(lǐng)域的應(yīng)用主要是作為核糖核酸檢測試劑盒中的陽性對照標準品和內(nèi)控標準品。最新的 CFDA 申報指導(dǎo)原則中就明確提出用假病毒作為陽性標準品和內(nèi)控標準品（詳見國家食品藥品監(jiān)督總局 2015 年第 93 號文件）。

相對于裸 DNA 和裸 RNA，假病毒作為陽性標準品和內(nèi)控標準品主要有以下優(yōu)勢：

在聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）中，不同形式的基因模板在反應(yīng)中的擴增效率不一致，裸露核酸比臨床樣本中的基因模板要簡單得多，擴增效率比臨床樣本高。而假病毒中的核酸像野生病毒核酸一樣被蛋白外殼包裹，與臨床樣本進行平行處理，可以更真實反映臨床樣本中病毒核酸模板的擴增情況。

相較于傳統(tǒng)檢測試劑盒中以裸露的DNA和RNA作為陽性對照標準品，假病毒標準品的核酸分子因被蛋白外殼所包裹，蛋白外殼可以保護DNA或RNA分子不被降解，使核酸更穩(wěn)定，運輸儲存更方便。

假病毒可以作為核糖核酸試劑盒中的內(nèi)控標準品，參與臨床樣本核酸的平行提取，以對樣本核酸釋放/分離/純化效率、試劑及儀器性能、擴增效率等環(huán)節(jié)進行監(jiān)測。而裸露DNA 或者RNA 則無法通過模擬野生病毒來對這些環(huán)節(jié)進行檢測。

檢測試劑盒中陽性標準品的質(zhì)量在試劑盒中的重要性不言而喻，而是否有內(nèi)控標準品也 成為了申報和檢測試劑盒推廣的一項重要指標。

相較于使用滅活病毒，假病毒作為陽性標準品和內(nèi)控標準品也有其獨特優(yōu)勢：

| 第一、擴增曲線更真實。

在聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）中，不同形式的基因模板在反應(yīng)中的擴增效率不一致，裸露核酸比臨床樣本中的基因模板要簡單得多，擴增效率比臨床樣本高。而假病毒中的核酸像野生病毒核酸一樣被蛋白外殼包裹，與臨床樣本進行平行處理，可以更真實反映臨床樣本中病毒核酸模板的擴增情況。

| 第二、性能更穩(wěn)定。

相較于傳統(tǒng)檢測試劑盒中以裸露的DNA和RNA作為陽性對照標準品，假病毒標準品的核酸分子因被蛋白外殼所包裹，蛋白外殼可以保護DNA或RNA分子不被降解，使核酸更穩(wěn)定，運輸儲存更方便。

| 第三、避免假陰性。

假病毒可以作為核糖核酸試劑盒中的內(nèi)控標準品，參與臨床樣本核酸的平行提取，以對樣本核酸釋放/分離/純化效率、試劑及儀器性能、擴增效率等環(huán)節(jié)進行監(jiān)測。而裸露DNA 或者RNA 則無法通過模擬野生病毒來對這些環(huán)節(jié)進行檢測。

| 第四、臨床申報和推廣更容易。

檢測試劑盒中陽性標準品的質(zhì)量在試劑盒中的重要性不言而喻，而是否有內(nèi)控標準品也 成為了申報和檢測試劑盒推廣的一項重要指標。

相較于使用滅活病毒，假病毒作為陽性標準品和內(nèi)控標準品也有其獨特優(yōu)勢：

用含野生型病毒的血清作為原材料，在一定程度上仍具有生物傳染性。例如HIV-1 RNA國際標準物質(zhì)，按照許多國家的法律，可能會禁止此類物質(zhì)的運輸和使用。同時，制作滅活病毒需要具備BLS3甚至BLS4實驗室，只有部分專業(yè)研究機構(gòu)具備相應(yīng)的條件，而假病毒安全性高，常規(guī)BLS2實驗室就可以制備，無疑使核酸檢測試劑盒的研究與開發(fā)可以更廣泛的開展。

漢恒生物技術(shù)團隊在國內(nèi)率先開發(fā)出高效的假病毒純化技術(shù)，可得到低核酸殘留的假病毒顆粒。目前本公司假病毒生產(chǎn)工藝已通過 ISO 9001 質(zhì)量管理體系認證，可大規(guī)模生產(chǎn)制備各類 DNA/RNA 假病毒，滴度高，純度高，核酸殘留低，批次穩(wěn)定。

部分假病毒現(xiàn)貨（核酸標準品用）：

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假病毒

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