ActinRed 555 Probes(細(xì)胞骨架紅色熒光探針)一種高親和的 F-肌動蛋白探針由Flour 熒光染料與鬼筆環(huán)肽偶聯(lián)而成。這些熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽對于不同物種（包括動植物）的細(xì)胞骨架肌動蛋白具有相同的結(jié)合特性。此外，這些鬼筆環(huán)肽偶聯(lián)物對 F-肌動蛋白具有高親和性和高選擇性，廣泛用于多色成像研究領(lǐng)域。最大激發(fā)/發(fā)射波長（Ex/Em）: 540～546/565～575nm。

ActinRed 555 ReadyProbes 染色方法：
注意：對于某些特定的實(shí)驗(yàn)體系，我們提供的染色方案可能需要優(yōu)化。但在大多數(shù)情況下，按照本操作說明可取得一致的結(jié)果。
以下方法以細(xì)胞爬片的染色步驟為例：
1. 用 PBS（pH7.4）輕輕洗滌細(xì)胞爬片。
2. 用 3.7%的多聚甲醛（PBS 配制）室溫固定細(xì)胞，時(shí)間為 10 分鐘。
注意：甲醇在固定過程中可能會破壞細(xì)胞肌動蛋白，因此**避免任何含甲醇的固定劑。首選的固定劑是不含甲醇的多聚甲醛溶液。
3. 用 PBS 清洗細(xì)胞樣品兩遍或以上。
4. 將細(xì)胞爬片置于干凈的玻璃培養(yǎng)皿中，用含 0.1% Triton X-100 的 PBS 緩沖液室溫透化樣本，處理時(shí)間 3-5 分鐘。（也可使用丙酮溶液透化處理，但需至于-20℃）
5. 用 PBS 清洗細(xì)胞樣品兩遍或以上。
6. 用含 1% BSA 的 PBS 封閉細(xì)胞，時(shí)間為 20-30 分鐘。
7. 向細(xì)胞爬片上滴加兩滴 ActinRed 555 Probes，室溫避光孵育 30 分鐘。為避免染料蒸發(fā)，請將爬片置于密閉的濕盒中。
8. 用 PBS 清洗細(xì)胞樣品兩遍或以上。
9. 如需長期保存，請將細(xì)胞樣品至于空氣中自然晾干，并用封片劑封片。儲存于 2-6℃避光環(huán)境下的樣品正?？芍辽俦４姘肽辍?/p>

圖 1:使用 Image-iT 固定/透化試劑盒固定和透化 BPAE 細(xì)胞。 肌動蛋白使用 ActinRed 555 ReadyProbes 試劑染色，細(xì)胞核使用 NucBlue Fixed 染色。