CFDA-SE,細(xì)胞增殖示蹤熒光探針
CFDA-SE簡介
CFDA-SE,細(xì)胞增殖示蹤熒光探針，是細(xì)胞膜可滲透的，并且很容易在活細(xì)胞內(nèi)積聚，在那里它與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合。 水解的 CFSE 發(fā)出綠色熒光，共價(jià)連接的熒光素分子不會(huì)從細(xì)胞中泄漏。 CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞可以在體內(nèi)監(jiān)測(cè)數(shù)周。 因此，CFSE 可用于檢測(cè)活細(xì)胞以及通過熒光顯微鏡對(duì)細(xì)胞活動(dòng)進(jìn)行長期觀察。 CFSE 標(biāo)記細(xì)胞的激發(fā)和發(fā)射波長分別為 500 nm 和 520 nm。
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 使用方法：
1.CFSE儲(chǔ)存液（5mM）的配制
用1ml DMSO溶解2.79mg CFSE，充分混勻即得到5mM的儲(chǔ)存液（1mg/ml的CFSE溶液濃度相當(dāng)于其摩爾濃度1.8mM）。
【注意】該儲(chǔ)存液需立即使用，根據(jù)使用量計(jì)算如有剩余請(qǐng)務(wù)必分裝后于≤-20℃避光干燥保存，避免反復(fù)凍融。
2.CFSE工作液（0.5-5μM）的配制
使用前用含20mM Hepes的Hanks 緩沖液（HHBS）或其他不含氨基的合適緩沖液（pH=7.0）對(duì)上述CFSE 儲(chǔ)存液進(jìn)行1,000~10,000倍稀釋，并旋渦震蕩混勻。
3.操作方法
活細(xì)胞染色的推薦步驟，可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，用適當(dāng)藥物處理細(xì)胞；
離心收集細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為1-5×105個(gè)/管；
用500μl CFSE工作液懸浮細(xì)胞，于室溫或37℃避光孵育10-30min；
吸除CFSE 染液，用HHBS或其他合適緩沖液清洗細(xì)胞，用500μl預(yù)熱HHBS或培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞；
在Ex/Em=490/520nm下用流式細(xì)胞儀（FL1通道）或熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
CFSE 細(xì)胞染色
細(xì)胞類型：海拉HeLa
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 應(yīng)用領(lǐng)域：?
1.細(xì)胞增殖檢測(cè)（尤其對(duì)淋巴細(xì)胞）
2.體內(nèi)示蹤?
3.細(xì)胞熒光標(biāo)記?
4.細(xì)胞毒性檢測(cè)
