? ? ? ?拉曼光譜分析法是基于印度科學(xué)家C.V.拉曼(Raman)所發(fā)現(xiàn)的拉曼散射效應(yīng)， 對(duì)與入射光頻率不同的散射光譜進(jìn)行分析以得到分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)方面信息， 并應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)研究的一種分析方法。本文中鑠思百小編就來介紹一下Raman光譜測(cè)試時(shí)會(huì)需要哪些常見問題。

? ? ? ?兩者是一回事。ramanshift即為拉曼位移或拉曼頻移，頻率的增加或減小常用波數(shù)差表示，拉曼光譜儀得到的譜圖橫坐標(biāo)就是波數(shù)wavenumber，單位cm-1。在Raman 譜中， wavenumber有兩種理解，一種是相對(duì)波數(shù)，這時(shí)就等于Ramanshift;另一種是絕對(duì)波數(shù)(這在熒光光譜中用的比較多)，這個(gè)絕對(duì)波數(shù)是與激發(fā)波長(zhǎng)有關(guān)，不同的激發(fā)波長(zhǎng)得到的絕對(duì)波數(shù)是不一樣的，這時(shí)Ramanshift等于(10000000/激發(fā)波長(zhǎng)減去Raman峰的絕對(duì)波數(shù))。所以通常在Raman譜中，wavenumber一般可理解為Ramanshift。

? ? ? ?2.如何用拉曼光譜儀測(cè)透明的有機(jī)物液體，測(cè)試時(shí)放到了玻璃片上測(cè)出來的結(jié)果是玻璃的光譜。

a. 可能是測(cè)試用玻璃管被污染的比較嚴(yán)重。

b. 有可能是焦點(diǎn)的位置不對(duì)，聚在了玻璃上。

c.用凹面載玻片，?液體量會(huì)比較多，然后用顯微鏡聚焦好就可以了，如果液體有揮發(fā)性，最好液體上用蓋玻片，然后焦點(diǎn)聚焦到蓋玻片以下。

? ? ? ?3.我們這里有做生物樣品的拉曼光譜的，在獲得的圖里面有很強(qiáng)的熒光，有的說，如果拉曼得不到就用其熒光譜?？晌蚁雴栆幌拢诶V里面得到的熒光背景，是真正的熒光特征譜嗎?這和熒光光譜儀里面的熒光圖有什么區(qū)別?

? ? ? ?原則上說，拉曼譜中的熒光和熒光譜中的熒光是一樣的，只要激發(fā)波長(zhǎng)和功率密度相同。注意橫坐標(biāo)要從波數(shù)變換為納米，即用10000000nm(1cm)除以波數(shù)就行了。但有一點(diǎn)要注意，不同波長(zhǎng)的激發(fā)光照射樣品，得到的拉曼相近，但熒光可以有很大不同，甚至相同波長(zhǎng)不同功率激發(fā)，熒光譜都大不一樣。

? ? ? ?生物樣品一般熒光峰比較寬，用熒光光測(cè)試之前一般先會(huì)做儀器本身曲線校正也就是儀器本身的響應(yīng)曲線，這樣測(cè)出的熒光峰才比較準(zhǔn)，特別是對(duì)于寬峰更要做這個(gè)較準(zhǔn)。而Raman 光譜一般采集的區(qū)域比較窄(指的是波長(zhǎng)區(qū)域)，一般在窄的波長(zhǎng)范圍變化不大，因此一般不考慮儀器本身響應(yīng)曲線誤差，但是Raman光譜來測(cè)寬熒光峰，影響就比較大。

總結(jié)

作為常用的一種測(cè)試方法，拉曼測(cè)試在光譜分析中有著很重要的作用，能夠了解并解決測(cè)試時(shí)的各種問題，對(duì)我們的研究有著很大的幫助。如果需要了解更多Raman測(cè)試相關(guān)內(nèi)容，可以聯(lián)系我們鑠思百檢測(cè)！鑠思百檢測(cè)作為華中地區(qū)領(lǐng)先的第三方權(quán)威機(jī)構(gòu)，與武漢眾多高校及其分析測(cè)試中心有交流合作。除Raman測(cè)試以外，掃描電鏡，透射電鏡，X射線電子能譜，熱重分析等測(cè)試都有豐富的經(jīng)驗(yàn)，歡迎聯(lián)系送樣測(cè)試！