關(guān)鍵詞： 實(shí)驗(yàn)室污染? ? PCR實(shí)驗(yàn)室污染 ?氣溶膠污染

PCR擴(kuò)增過程中會(huì)產(chǎn)生DNA/RNA氣溶膠污染的問題。極其微量的氣溶膠污染即可造成假陽性的結(jié)果，進(jìn)而可能引起整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的甚至要關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室。目前治理氣溶膠污染的常規(guī)方法有：酒精擦拭、紫外線照射、高壓變性。這三種方法都存在不同程度的缺陷。若PCR實(shí)驗(yàn)室遇到DNA/RNA氣溶膠污染，建議您采取以下措施防治:。

1、氣溶膠污染最容易在移液器加樣的時(shí)候產(chǎn)生，因此是不可避免的。它會(huì)很快地發(fā)生沉降，浮游。傳統(tǒng)的紫外線，酒精擦拭，84消毒液雖然有一定的功效，但是去除率不理想，同時(shí)帶來了很多新的問題，深圳潤聯(lián)環(huán)保出品的NOVOCIDE AIR，經(jīng)過第三方實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)證，對(duì)于核酸污染可以快速清除，針對(duì)實(shí)驗(yàn)室無疑是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。

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2、氣溶膠污染顆粒其直徑約為從0.002－100 μm?大小的液滴或固態(tài)粒子，就目前所知，只有空氣過濾系統(tǒng)。氣溶膠可以被過濾材料所吸附。因此，任何使形成氣溶膠的危險(xiǎn)性上升的操作都必須在生物安全柜或通風(fēng)柜里進(jìn)行，或者是開通實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)。如果不具備以上條件的，也應(yīng)多注意房間通風(fēng)。

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3、PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)隔。PCR實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)區(qū)域，即試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。

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4、熒光定量PCR能顯著減少了實(shí)驗(yàn)室PCR產(chǎn)物污染的可能性。PCR產(chǎn)物是轉(zhuǎn)基因檢測實(shí)驗(yàn)室最主要的污染來源之一，而熒光定量PCR不需要電泳，因此反應(yīng)結(jié)束后不需要開蓋，避免了反應(yīng)產(chǎn)物泄漏造成的污染。而進(jìn)行凝膠電泳增加了檢測步驟，易產(chǎn)生氣溶膠污染。建議推進(jìn)定量PCR的應(yīng)用，并逐步替代定性PCR。并且不定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行預(yù)防式核酸污染去除，以避免發(fā)生大規(guī)模核酸氣溶膠污染。

5、值得注意的是，要去除DNA污染而不是僅僅滅菌的話，常規(guī)紫外線照射建議應(yīng)延長至2小時(shí)，即使這樣，紫外照射對(duì)去除小片段（200bp以下）的DNA污染但效果仍然不佳，可采用諾威仕公司生產(chǎn)的全方位核酸清除儀配合深圳潤聯(lián)環(huán)保出品的NOVOCIDE AIR通過兩者的共同作用，將NOVOCIDE AIR在實(shí)驗(yàn)室空間進(jìn)行干霧彌漫，達(dá)到無孔不入，同時(shí)對(duì)物表及空間達(dá)到最佳氣溶膠污染去除目的。

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