依次打開(kāi)開(kāi)關(guān)123，但是每個(gè)開(kāi)關(guān)之間要間隔10秒鐘，打開(kāi)一，稍微停頓。然后打開(kāi)2嗯稍微停頓一下，然后打開(kāi)3，鑰匙轉(zhuǎn)向豎直，顯示屏下面的這個(gè)開(kāi)關(guān)，打開(kāi)這個(gè)鹵素?zé)魺粼?。四打開(kāi)鹵素?zé)魺粼聪旅娴娘@微鏡控制開(kāi)關(guān)以及電腦的開(kāi)關(guān)。

六然后等待這個(gè)顯微鏡啟動(dòng)以及電腦啟動(dòng)啊，然后現(xiàn)在所有的設(shè)備都打開(kāi)了，打開(kāi)LASX這個(gè)軟件，雙擊。

我們?cè)谀龠@個(gè)模式下，點(diǎn)擊ok讓軟件啟動(dòng)。軟件打開(kāi)之后呢，點(diǎn)擊這個(gè)add lezer右邊這個(gè)三條橫杠，點(diǎn)擊之后將這個(gè)405激光器啊，然后WIL激光器。哦，然后7這次呢開(kāi)機(jī)完成，然后開(kāi)好機(jī)之后呢，我們開(kāi)始進(jìn)行放樣啊。因?yàn)檫@是個(gè)倒置顯微鏡，所以撥片的話(huà)要告知薄的面面調(diào)架你的話(huà)就正常放置，然后調(diào)節(jié)要么你夾的大小，然后放好之后。放下提身。那我們先來(lái)熟悉一下這個(gè)顯微鏡的觸摸屏啊。然后第一個(gè)頁(yè)面呢是主頁(yè)面，它會(huì)顯示我們的物鏡放大倍數(shù)以及一些NA值。然后第二個(gè)色彩盤(pán)呢啊它會(huì)顯示這種觀(guān)察方式，常用的是這個(gè)BF明上觀(guān)察方式，以及這個(gè)呃FLorence影場(chǎng)觀(guān)察熒熒光觀(guān)察方式。然后第三個(gè)界面呢是物鏡信息10倍24時(shí)以及63倍啊，前3個(gè)12 14時(shí)是空氣凈干凈頭，63倍呢是油鏡。呃，它們之間相互做切換的時(shí)候呢，比如說(shuō)我現(xiàn)在從干凈切換到油鏡的時(shí)候，油鏡首先會(huì)閃爍。當(dāng)我再次點(diǎn)擊油鏡的時(shí)候，它才會(huì)進(jìn)行切換啊。然后我現(xiàn)在是十倍鏡，我切換到10倍鏡啊，然后第四個(gè)呢XYZ對(duì)應(yīng)的就是我鏡頭的焦距。當(dāng)我微微調(diào)焦的時(shí)候，這個(gè)值呢會(huì)發(fā)生一定的變化啊，當(dāng)我們關(guān)機(jī)的時(shí)候需要用它將鏡頭降到最低。長(zhǎng)按我們以這個(gè)樣本為例，如果說(shuō)我們是組織樣本呢，通常是使用空氣鏡是24時(shí)進(jìn)行觀(guān)察啊，

那我就可以從十倍鏡開(kāi)始。如果是細(xì)胞你想使用油鏡的話(huà)，一般是從63倍C加鏡油找油圈開(kāi)始啊，那我這是個(gè)組成樣本，從十倍鏡開(kāi)始找焦點(diǎn)，擊十倍鏡，然后點(diǎn)擊色彩盤(pán)選擇，然后我染的熒光一個(gè)是代替一個(gè)FITC，那我選擇熒光觀(guān)察方式啊，點(diǎn)擊之后在下面一行呢把SH特ter打開(kāi)，然后看一下depy是被選擇的。選擇好我要觀(guān)察的之后呢，我先切換到這個(gè)樣本這邊，然后我現(xiàn)在感覺(jué)是沒(méi)有光的。如果說(shuō)你想確認(rèn)一下，你可以點(diǎn)擊FITC，因?yàn)樗墓獾膹?qiáng)度會(huì)比較強(qiáng)，這時(shí)候出來(lái)光說(shuō)明光路是沒(méi)有問(wèn)題的那我繼續(xù)切回到depy界面進(jìn)行觀(guān)察

啊，這時(shí)候?yàn)槭裁锤杏X(jué)它沒(méi)有光呢？我可以通過(guò)調(diào)節(jié)這個(gè)操作桿移動(dòng)這個(gè)樣本的位置，然后我們挪一下。當(dāng)我距離我的樣本有點(diǎn)遠(yuǎn)的時(shí)候呢，你會(huì)感覺(jué)不到光。當(dāng)我比較靠近我的樣本，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)它會(huì)有白色的被激發(fā)出來(lái)的比較強(qiáng)的光，這說(shuō)明我的激光照射我的樣本上了。這時(shí)候我開(kāi)始準(zhǔn)備目鏡照焦。這時(shí)候呢我在十倍鏡下找好了焦啊，可以切換到20倍鏡我的最終的拍攝倍數(shù)，然后再次找焦。這時(shí)候基本上只需要微微調(diào)整一下就可以找到膠。然后我可以在這個(gè)色彩盤(pán)的這個(gè)界面把這個(gè)shutter關(guān)閉掉，或者切換到主界面把這個(gè)shutter關(guān)閉掉。那我們現(xiàn)在到了軟件的這個(gè)acquisition界面，呃，首先看一下這個(gè)acquisition word是不是XYZ啊，我們也選擇XYZ進(jìn)行常規(guī)拍攝啊，然后緊接著看一下接下來(lái)的一些參數(shù)XY啊他有時(shí)候是收起來(lái)，我們可以把它展開(kāi)，然后選擇發(fā)文章的要求。1024乘1024speed呢一般選擇是400，然后zoom factor啊看一下是不是1.0，然后緊接著這個(gè)like average我們選擇3。This steack呢是拍這個(gè)3D層掃的，我們要通過(guò)begin和end設(shè)置樣本厚度，然后來(lái)進(jìn)行拍攝。啊，這里我們只進(jìn)行常規(guī)的2D拍攝啊，不做展示。然后到第二列，我們首先看第一行，它展示的是這個(gè)物鏡信息。我剛剛選擇的是20倍物鏡，然后我接下來(lái)呢要通過(guò)這個(gè)小人進(jìn)這個(gè)染料助手帶assistant進(jìn)行熒光染料的設(shè)定。比如說(shuō)我這個(gè)樣本呢染了這個(gè)488和單品，那我可以在這個(gè)這個(gè)帶里面選擇我的常用的荒，比如說(shuō)BAPI選擇，然后再選一個(gè)488。然后通常選擇呢串色比較少的，然后選擇一個(gè)接收相對(duì)多的。如果不想過(guò)多糾結(jié)呢，那你就選擇最后一個(gè)選項(xiàng)，點(diǎn)擊apply。這時(shí)候呢光路就給我們應(yīng)用上了。但是如果說(shuō)你在拍攝的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)背景有一點(diǎn)墻，我們可以通過(guò)調(diào)整這個(gè)吸收波長(zhǎng)，然后來(lái)減少它的背景值。一般來(lái)說(shuō)該地的這個(gè)接收范圍呢大概調(diào)整在470 480左右。然后左邊這幾個(gè)按鍵呢，我們常用的是fast live。對(duì)于fast live來(lái)說(shuō)呢，我們可以點(diǎn)擊右邊進(jìn)行設(shè)置。初始值呢它默認(rèn)的是256。這時(shí)候呢你預(yù)覽的這個(gè)畫(huà)面可能會(huì)有點(diǎn)粗糙，你可以鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)住它。然后向右拉設(shè)置成512，然后將它關(guān)閉。然后右邊呢這個(gè)對(duì)應(yīng)的是我們拍攝界面，我們?yōu)榱朔奖阌洃洠y(tǒng)一選擇這個(gè)start，然后來(lái)進(jìn)行拍攝。無(wú)論是高級(jí)功能還是常規(guī)拍攝都可以使用這個(gè)按鍵。接下來(lái)我們勾選單個(gè)通道啊，白色的框選中它，然后點(diǎn)擊fast life。哎，這時(shí)候呢沒(méi)有出現(xiàn)我的熒光信號(hào)，那有可能是我的這個(gè)參數(shù)值比較低，也有可能是我焦急的問(wèn)題。這時(shí)候呢我可以把我的這個(gè)變值smart inge適當(dāng)?shù)南蛏险{(diào)整。在我上調(diào)的過(guò)程中出現(xiàn)了我的熒光信號(hào)，這個(gè)值的范圍呢是不超過(guò)100，盡量呢盡量不要超過(guò)七八十啊。

如果你到七八十熒光信號(hào)還比較弱，可能你更適合于再重新制一次樣。然后我們?cè)谶@個(gè)程度上微微調(diào)整一下焦，然后這時(shí)候呢?zé)晒饩€(xiàn)的話(huà)比較亮，然后我們可以把它值再稍微降低一點(diǎn)點(diǎn)，稍微再降一點(diǎn)點(diǎn)啊，讓他不要過(guò)爆啊，我們可以適當(dāng)?shù)那穲?bào)一點(diǎn)點(diǎn)，但是一定不要過(guò)報(bào)。然后這個(gè)通道呢我們就設(shè)置好了，然后點(diǎn)擊stop停止預(yù)覽，然后切換到第二個(gè)通道，白框選中它進(jìn)行fastlive，這個(gè)值呢相對(duì)來(lái)說(shuō)會(huì)偏暗很多。嗯，那我把它這個(gè)smart ain同樣的向上調(diào)，這時(shí)候呢出來(lái)一定的熒光信號(hào)。我調(diào)整我的這個(gè)焦距啊，然后我也通可以通過(guò)這個(gè)上下來(lái)調(diào)整我的載物臺(tái)的XY的位置，挪動(dòng)一下，尋找我要拍攝的區(qū)域。假如說(shuō)到這個(gè)區(qū)域是比較合適的啊，然后如果說(shuō)我覺(jué)得比較暗，我還可以把這個(gè)intensity的值適當(dāng)向上調(diào)一點(diǎn)點(diǎn)，優(yōu)先調(diào)整這個(gè)smart gain，然后其次調(diào)整intensity啊，稍微調(diào)整一點(diǎn)。然后這個(gè)intensiity的限制呢就是不超過(guò)10。這兩個(gè)值的增大呢都會(huì)增加我的信號(hào)，但同樣也會(huì)增加我的背景值啊，然后調(diào)到一個(gè)相對(duì)比較合適的狀態(tài)，然后我們點(diǎn)擊stop，然后點(diǎn)擊。start進(jìn)行拍攝。這時(shí)候兩個(gè)通道的圖呢就掃描完成了啊，如果說(shuō)我對(duì)這個(gè)比較強(qiáng)的信號(hào)感興趣，想對(duì)它截取放大，我們現(xiàn)在來(lái)講一個(gè)不容易出錯(cuò)的方式。然后我首先在這個(gè)頁(yè)面下選擇這個(gè)強(qiáng)信號(hào)所對(duì)應(yīng)的通道綠色通道，然后點(diǎn)擊發(fā)slive出來(lái)預(yù)覽一張預(yù)覽圖之后，我點(diǎn)擊stop。點(diǎn)擊完stop之后呢，我將zoom in打開(kāi)在右邊的圖上將我的這個(gè)目標(biāo)區(qū)域畫(huà)進(jìn)去，盡量畫(huà)成一個(gè)正方形，盡量讓你的熒光信號(hào)處于視野的中央。然后我再次點(diǎn)擊fast live，然后立馬點(diǎn)停。這次的目的我并不是為了調(diào)焦，而是為了看一下我的zone factor值。

比如說(shuō)我只想放大到3.0，我可以把它從factor修正到3.0，輸入3加enter，然后點(diǎn)擊star進(jìn)行拍照。這時(shí)候呢，我剛剛勾選的區(qū)域呢就被他采集到了。如果想要換一個(gè)比較大的視野重新預(yù)覽，那我們把zoomfactor值恢復(fù)成一加一個(gè)enter啊，然后第一繼續(xù)點(diǎn)擊fast live，然后調(diào)整我這個(gè)操作桿的。嗯，旋轉(zhuǎn)它，然后挪到其他合適的視野進(jìn)行拍照。找到合適的視野之后，點(diǎn)擊stop重復(fù)上述操作。當(dāng)我所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后啊，點(diǎn)到acquisition左邊的open project，然后將我的project選中，右鍵save project保存在E盤(pán)data，然后對(duì)應(yīng)日期的文件夾里。比如說(shuō)我這是第三組。然后保存。這時(shí)候我的文件夾里就會(huì)有一個(gè)我對(duì)應(yīng)的這個(gè)數(shù)據(jù)，包含我所有的文件信息啊，一共是十七兆。后續(xù)可以在自己的電腦上將圖片導(dǎo)出。

關(guān)機(jī)的時(shí)候呢，先關(guān)軟件，關(guān)軟件之前先把這個(gè)愛(ài)的laser后面三個(gè)杠里面的激光關(guān)掉啊（laser view），棒點(diǎn)成off啊，然后將這個(gè)trmple關(guān)閉，然后自己的文件save project保存在這個(gè)日期的文件夾里，然后保存完了之后軟件關(guān)閉。軟件關(guān)閉完了之后呢，你可以拷貝自己的數(shù)據(jù)，使用光盤(pán)拷貝數(shù)據(jù)。

然后顯微鏡這邊。顯微鏡這邊呢啊如果使用油鏡的話(huà)，然后要注意清潔鏡頭。如果沒(méi)有使用油鏡的話(huà)，點(diǎn)擊第三個(gè)物鏡的按鍵，然后切換到10倍鏡啊，切換到10倍鏡之后，點(diǎn)擊第4個(gè)XYZ這個(gè)按鍵，然后長(zhǎng)按向下這個(gè)箭頭，

哎，讓鏡頭降到最低。然后關(guān)閉顯微鏡開(kāi)關(guān)，五號(hào)開(kāi)關(guān)，關(guān)閉鹵素?zé)艄庠?，四?hào)開(kāi)關(guān)，然后關(guān)閉機(jī)關(guān)柜鑰匙，三號(hào)關(guān)開(kāi)關(guān)轉(zhuǎn)向水平，然后關(guān)閉。關(guān)閉一號(hào)開(kāi)關(guān)。啊，如果電腦刻錄完成之后，將電腦關(guān)閉。等電腦指示燈變成橙色之后，單機(jī)完成，然后照上寫(xiě)為，然后登記撤退。