水溶性CY3,Sulfo-Cyanine3,磺化Cy3
水溶性CY3 ?Sulfo-Cyanine3
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磺化Cy3(sulfo-Cy3)標(biāo)記分子,可在水相中標(biāo)記各種官能團(tuán),適用于標(biāo)記對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子
普通Cy染料 vs 磺化Cy染料
盡管普通Cy和磺化-Cy在熒光光學(xué)性質(zhì)上面近似,但它們?cè)谶m用條件和標(biāo)記方法上仍有所不同。普通Cy染料水溶性低,必須預(yù)先溶解在有機(jī)溶劑(比如DMF或DMSO)中,然后加入到標(biāo)記反應(yīng)體系中,有機(jī)溶劑在有機(jī)/水混合溶劑中的含量需要達(dá)到10-15%(體積比率)才能保證染料不析出。相反,磺化-Cy染料在水中溶解性很好,可直接在水溶液(比如PBS緩沖液)中標(biāo)記,因此特別適用于蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的標(biāo)記對(duì)象。如果希望反應(yīng)后通過(guò)透析的方式純化,務(wù)必使用磺化-Cy染料,磺化-Cy染料溶于水,多余的染料可以被透析出。如果通過(guò)離子交換樹(shù)脂、電泳、凝膠過(guò)濾法純化,普通Cy和磺化-Cy都適用。
普通Cy和磺化-Cy的適用條件分以下幾種情況:
兩種染料都適用:
????· 較穩(wěn)定的蛋白類,可承受少量有機(jī)溶劑長(zhǎng)達(dá)數(shù)小時(shí)的
????· 抗體(一般可承受5-10% of DMSO/DMF)
????· DNA、RNA等核酸類
????· 天然或者有機(jī)合成的高分子材料
????· 多肽
????· 可溶于DMF、DMSO、甲醇的小分子化合物
必須使用磺化-Cy染料:
????· 敏感性蛋白,特別是有機(jī)溶劑會(huì)誘導(dǎo)變性的蛋白
????· 需透析純化的
????· 對(duì)有機(jī)溶劑敏感的納米材料
必須使用普通Cy染料:
????· 必須在氯仿、乙醚等水不混溶型有機(jī)溶劑中標(biāo)記的反應(yīng)
????· 標(biāo)記后的產(chǎn)物希望仍然脂溶型或者希望其仍可透過(guò)細(xì)胞膜的探針
????· 需要包裹裝載的,比如載入納米核的疏水微環(huán)境
