1．包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

WBR0113

紅細(xì)胞裂解液

100 ml

2．保存條件：本產(chǎn)品4℃保存，一年有效；室溫保存，?3個(gè)月有效。

3．產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

我們生產(chǎn)的紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，經(jīng)過優(yōu)化配方，用于裂解小鼠脾臟等造血組織或者人外周血中懸浮細(xì)胞中的紅細(xì)胞。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。小鼠胸腺和淋巴結(jié)細(xì)胞不需要使用此裂解液。本裂解液經(jīng)過無菌過濾，處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。

4．使用說明：

A．對(duì)于組織細(xì)胞樣品：

1)????????新鮮組織經(jīng)過消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，收集小鼠脾細(xì)胞制備單細(xì)胞懸浮液。

2)????????4°C?，400-500 g離心棄上清取沉淀。

3)????????加入3-5倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，在冰上裂解4-5 min，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。例如細(xì)胞沉淀的體積為1 ml，則加入3-5 ml的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4°C操作均可。

4)????????4°C 400-500 g離心5 min，棄紅色上清。

5)????????如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟3和步驟4一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。

6)????????加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀洗滌1-2次，4°C，400-500 g離心2-3 min，棄上清。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。

7)????????根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)密度，進(jìn)行下一步染色。

B．對(duì)于血液樣品：

1)????????取新鮮抗凝血，4°C?，400-500 g離心5 min，離心棄上清。

2)????????加入6-10倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，在冰上裂解4-5 min，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。例如細(xì)胞沉淀的體積為1 ml，則加入6-10 ml的紅細(xì)胞裂解液。

3)????????接下來的步驟與A中（4）-（7）相同。

5．注意事項(xiàng)：

1)????????對(duì)于微量或少量的血液樣品，可以在第一步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，并在室溫或4℃裂解4-5 min。

2)????????對(duì)于鼠的血液，裂解4-5 min已經(jīng)足夠。

3)????????對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至10 min，但通常不宜超過15 min，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。后續(xù)步驟相同。

*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用