基質(zhì)膠使用指南-基質(zhì)膠怎么用?(干貨)
?;?amp;ABW基質(zhì)膠浙江代理杭州昊鑫生物,今天我們一起看看基質(zhì)膠使用指南,基質(zhì)膠到底是怎么使用呢?
基質(zhì)膠(Matrigengel)是從富含胞外基質(zhì)蛋白的小鼠腫瘤細(xì)胞中提取出的天
然基底膜基質(zhì)(Basement membrane,BM)。由層粘連蛋白、四型膠原蛋
白、巢蛋白、糖蛋白以及多種細(xì)胞因子等組成。
?

ABW基質(zhì)膠產(chǎn)品有以下五種類型:
1、標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠,標(biāo)準(zhǔn)型推薦用于做血管生成,侵襲,腫瘤球這類研究細(xì)胞生長、分化、型態(tài)的實驗。
?
2、低生長因子基質(zhì)膠,低生長因子型相對于標(biāo)準(zhǔn)型差別在于進(jìn)行了低生長因子的處理。如EGF(表皮生長因子)、VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)、IGF(胰島素生長因子)等前面所說與糖蛋白相加僅占2%卻作用不凡的成分。細(xì)胞因子中有促進(jìn)細(xì)胞生長的因子與抑制細(xì)胞生長的因子,以及促進(jìn)細(xì)胞凋亡的因子如TGF-β在許多文章中都被提及會促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。而EGF、VEGF這些因子可以促進(jìn)細(xì)胞增殖,但同時也可能誘導(dǎo)細(xì)胞的分化。尤其是IGF這個因子(胰島素生長因子)很容易誘導(dǎo)細(xì)胞的分化,雖然含量不高但影響還是比較大的。因此對于做類器官培養(yǎng)實驗,一般推薦低生長因子型的基質(zhì)膠。
?
對于有無酚紅的基質(zhì)膠選擇:10-20年前大家大多使用的都是含酚紅培養(yǎng)基。當(dāng)時酚紅是一個極好的酸堿指示劑。在二維培養(yǎng)時可以很好地判斷培養(yǎng)基中的二氧化碳濃度以及細(xì)胞密度是否太高,營養(yǎng)是否充分?,F(xiàn)在我們知道酚紅有一定類雌激素功能,有微弱的雌激素作用。因此在分化、干細(xì)胞實驗時大多選擇無酚紅的基質(zhì)膠以及培養(yǎng)基。所以類器官培養(yǎng)一般會推薦使用低生長因子無酚紅基質(zhì)膠。
?
3、高濃度基質(zhì)膠,高濃度基質(zhì)膠蛋白濃度一般在16到26毫克左右,粘度比較高。它的特點是注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)后,在37°C的環(huán)境下能快速凝膠。一般用在PDX動物模型,體內(nèi)成管,皮下成瘤??梢院芎玫谋3至Ⅲw型態(tài),如果不加入基質(zhì)膠將細(xì)胞直接注射到小鼠皮下的話,細(xì)胞會在皮下迅速擴(kuò)散流失。而有基質(zhì)膠的介入便可使注射進(jìn)入的細(xì)胞很好的固定在原處,并形成局部的環(huán)境更利于腫瘤的生長不易被小鼠的免疫系統(tǒng)清除。同時,在固定地點生長的腫瘤更方便后續(xù)取出進(jìn)行統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析。
?
4、干細(xì)胞專用基質(zhì)膠,干細(xì)胞基質(zhì)膠適合用于ips細(xì)胞以及干細(xì)胞的生長和分化。對于干細(xì)胞誘導(dǎo)類器官生長實驗的客戶,如做心臟類器官與腦類器官,我們一般也推薦使用干細(xì)胞基質(zhì)膠。干細(xì)胞基質(zhì)膠是在低生長因子基質(zhì)膠中優(yōu)化篩選的基質(zhì)膠,因此它本身經(jīng)過類器官培養(yǎng)質(zhì)檢驗證,同時也適合干細(xì)胞生長分化。
?
5、類器官專用基質(zhì)膠。類器官基質(zhì)膠同樣也是在低生長因子之上優(yōu)化的基質(zhì)膠。在質(zhì)檢時,我們會用小鼠小腸類器官進(jìn)行連續(xù)七代的傳代培養(yǎng)驗證,只有培養(yǎng)效果極好的,才會被定義為類器官基質(zhì)膠。與低生長因子基質(zhì)膠相比,有著更加嚴(yán)格的質(zhì)檢。
?
基質(zhì)膠目前應(yīng)用廣泛的4個領(lǐng)域:
1、類器官模型,
2、血管生成模型,
3、腫瘤模型,
4、干細(xì)胞研究,