腦缺血(CI)大鼠模型
腦缺血是一種常見病,已成為引起人類死亡的第三大原因。大腦中動脈(MCA)是人群腦卒中的多發(fā)部位,MCA閉塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型被普遍認為局灶性腦缺血的標準動物模型,主要有開顱法、光學法、線栓法、栓塞法。下面我們看看常見的栓線法......
制備
動物品系:SD大鼠,SPF級,健康,雄性,體重:250g-300g
造模方式:缺血再灌注(MCAO線栓法)
實驗分組:對照組,模型組,陽性藥物組,受試藥物低、中、高組
造模方法
1.麻藥腹腔注射麻醉大鼠,使其仰臥固定于手上臺上,頸部備皮,消毒,插入肛溫探頭,保持體溫在37±0.5℃。
2.頸部正中切口,暴露右側(cè)頸總動脈和迷走神經(jīng),再逐步暴露勁總動脈分叉,頸內(nèi)動脈和頸外動脈。使用6-0絲線在距離頸總動脈分叉4mm處結(jié)扎頸外動脈遠心端,在頸外動脈穿入另一根6-0絲線,在靠近頸總動脈分叉處打一個活結(jié)。
3.使用動脈夾夾閉頸總動脈。在距離頸總動脈分叉處3mm處的頸外動脈上剪一個小口,將一根頭端處理過的0.33mm直徑的尼龍線從小口中插入,進入頸內(nèi)動脈,并向內(nèi)插入大腦中動脈,尼龍線的插入深度距離頸總動脈分叉處約16±1mm。
4.缺血后90min拔掉線栓,用6-0絲線結(jié)扎外動脈近心端,用3-0絲線縫合頸部傷口,活力碘消毒傷口,將大鼠放在加熱墊上,待清醒后放入恒溫撫養(yǎng)箱飼養(yǎng)。
5.術(shù)后24h,對大鼠進行神經(jīng)功能評分。
6.用TTC染色來確定腦梗死容積,做病理染色。
神經(jīng)功能評分
參考longa及Bederson的5分制法在動物麻醉清醒后24h進行評分,分值越高,說明動物行為障礙越嚴重。
0分:無神經(jīng)損傷癥狀
1分:不能完全伸展對側(cè)前爪
2分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈
3分:向?qū)?cè)傾倒
4分:不能自發(fā)行走,意識喪失
TTC染色:正常腦組織染色后呈鮮紅色,而梗死區(qū)呈蒼白色