鱟血變形細(xì)胞裂解物的制品檢測(cè)
1、使用凝膠法進(jìn)行鱟試劑成品內(nèi)毒素測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素含量為10EU/支,準(zhǔn)確加λ無(wú)內(nèi)毒素用水(以下簡(jiǎn)稱水)1.0ml,溶解,用封口膜封住安瓿口。
2、將封口安瓿放λ旋渦混合器上旋渦混合,一般情況下國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品是20~30min,工作標(biāo)準(zhǔn)品是10~15min(其要求的理由下述會(huì)闡明)混合時(shí)注意不要使安瓿內(nèi)溶液沾上封口材料。 3、將混合好的內(nèi)毒素溶液(此時(shí)濃度為10EU/ml)用水稀釋為2λ、λ、0.5λ及0.25λ濃度的系列濃度(λ為靈敏度),即1.0、0.5、0.25、0.125EU/ml濃度的系列溶液。 4、操作方法:①取20支無(wú)內(nèi)毒素試管分為4組,每組分別標(biāo)記上E1、E0.5、E0.25、?E0.125、E0(空白管陰性對(duì)照)。②分別吸取鱟試劑0.1ml?加入E0至E1的對(duì)應(yīng)試管。③E0管加入0.1ml水,其余各管加入0. 1ml與管上標(biāo)注數(shù)字相同濃度的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素。④用封口膜封閉試管,將試管內(nèi)容物輕輕搖勻。⑤把試管架放入37±2℃的恒溫水浴中保溫60±2min。在保溫過(guò)程中不能有任何震動(dòng),以免影響反應(yīng)的正常進(jìn)行。保溫時(shí)間結(jié)束后將試管取出觀察結(jié)果,注意,E0管需保溫至4h才取出觀察結(jié)果。⑥實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷:將試管緩慢翻轉(zhuǎn)180°,若管內(nèi)凝膠顯示堅(jiān)實(shí)不變形為陽(yáng)性,記錄為“+”;若無(wú)凝膠出現(xiàn)﹐或疑有凝膠但不能保持完整,從管壁滑脫,均判為“陰性”,記錄為“-”。