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每日科研進展 l 2022.06.01 l 碳源納米材料促進植物中dsRNA 的傳遞并增加 siRNA的產(chǎn)生

2023-07-24 09:54 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


碳點促進植物中 dsRNA 的傳遞并增加局部和系統(tǒng)性 siRNA 的產(chǎn)生

碳納米粒子在農(nóng)業(yè)中的使用是一個值得關注的對象,因為它們對植物發(fā)育或環(huán)境污染的潛在影響。研究人員從葡萄糖或蔗糖中獲得碳點作為成核源,用支鏈聚乙烯亞胺鈍化它們以開發(fā) dsRNA 納米復合材料。使用流體動力學分析、透射電子顯微鏡、X 射線光電子能譜和傅里葉變換紅外光譜對 CD 進行了全面表征。電位決定了CDs具有正電荷,具有良好的電泳遷移率和導電性,適合制備dsRNA納米復合材料。通過噴灑將裸露的或涂有CD的DsRNA遞送至黃瓜植物的葉子。對進入葉子的 dsRNA 進行定量顯示,當用 CD 包被時,檢測到的 dsRNA 比裸 dsRNA 多 50 倍(圖 1)。

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圖 1. 用dsRNA*FITC和gCD-dsRNA*FITC處理的黃瓜葉片在用蒸餾水清洗前后的共聚焦顯微鏡

此外,當 dsRNA 被 CD 包被時,源自噴霧 dsRNA 的特定 siRNA 的豐度增加了 13 倍。在遠端葉片中測定了系統(tǒng)性 dsRNA,當作為納米復合材料遞送時,其濃度顯著增加。類似地,當噴灑 CD-dsRNA 納米復合材料時,遠端葉片中的全身性 siRNA 明顯更豐富。此外,F(xiàn)ITC 標記的 dsRNA 顯示在質(zhì)外體中積累,并在涂有 CD 時增加其進入植物的機會(圖 2)。這些結果表明,通過水熱合成獲得的 CD 適用于 RNAi 植物應用中的 dsRNA 葉面遞送。

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圖 2. 用dsRNA*FITC(A,C)和gCD-dsRNA*FITC(B,D)處理的黃瓜葉片在用水沖洗后的高分辨率的共聚焦顯微鏡圖

植物中碳納米顆粒的損害已被證明是劑量依賴性的。因此,考慮到我們應用于植物以提供 dsRNA 的極少量(以微克為單位),我們預計植物發(fā)育不會出現(xiàn)問題。在將 gCDs 初步應用于黃瓜植物以控制黃瓜綠色輕度花葉病毒的 dsRNA 時,我們沒有觀察到植物生長的異常變化(未顯示)。因此,調(diào)節(jié)劑應考慮在田間農(nóng)業(yè)應用中可能需要的制劑中活性劑(dsRNA/siRNA)和伴隨佐劑的數(shù)量限制。這項研究表明,我們已經(jīng)使用水熱合成和透析獲得了碳納米顆粒,它們足以用于植物的 RNAi 應用,例如針對病毒、真菌或昆蟲的作物保護。


原文鏈接:

https:// doi.org/10.3390/ijms23105338

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