草莓作為應(yīng)時(shí)鮮果以其突出的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)功能在我國(guó)得到大面積的推廣種 植。由于種植草莓多采用無(wú)性繁殖，容易感染多種病毒。主要是草莓斑駁病毒、草莓輕性黃 邊病毒，草莓皺縮病毒和草莓鑲脈病毒，草莓病毒病給草莓生產(chǎn)造成嚴(yán)重的危害，使草莓減 產(chǎn)，嚴(yán)重影響生產(chǎn)。 由于生產(chǎn)生活需要和現(xiàn)有的栽培條件限制，產(chǎn)量高、品質(zhì)好及抗性強(qiáng)的草莓 脫毒苗的生產(chǎn)和育種困難。

　　5--6月于晴天的下午在健壯、無(wú)病的草莓剛抽出的匍匐莖上取莖尖，大小為0．3--0．4mm，作為組織培養(yǎng)的外植體。

　　用于草莓莖尖培養(yǎng)誘導(dǎo)芽分化的基本培養(yǎng)基為MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉6．5g／L，pH值調(diào)至5．8--6．0。

　　在草莓莖尖的擴(kuò)大繁殖階段，采用MS培養(yǎng)基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L。擴(kuò)大繁殖主要是將叢生苗分塊即每5--7株切成一塊，轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基。在轉(zhuǎn)苗過(guò)程中，去掉原生葉片有利于新苗分化，在擴(kuò)大繁殖中隨時(shí)清除愈傷組織，有利于新苗增殖和生長(zhǎng)。

　　誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基用1／2MS附加不同濃度IBA。試驗(yàn)表明：以IBA0．1mg/L的濃度處理的生根率高，為100％，平均根條數(shù)為2．4條。不加IBA及IBA濃度超過(guò)0．2mg/L，多數(shù)苗都是先于苗基切口處產(chǎn)生愈傷組織，隨后在愈傷組織上分化生根，致使成活率大大降低。

　　預(yù)處理 為了滅菌徹底，常把接種材料先進(jìn)行濕潤(rùn)處理，使滅菌劑能順利地滲入材料。可用多種濕潤(rùn)劑，我們采用的是75％的酒精，濕潤(rùn)的時(shí)間為半分鐘至1分鐘。

　　滅菌處理 在草莓組織培養(yǎng)中常用滅菌劑的種類很多。我們?cè)眠^(guò)次氯酸鈉10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接種材料10--15分鐘；次氯酸鈣(漂白粉)，用其飽和上清液，浸泡接種材料15--30分鐘；過(guò)氧化氫10--12％水溶液浸泡10--20分鐘；新潔爾滅5--10％水溶液，浸泡10--15分鐘；升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分鐘。其中前4種滅菌劑對(duì)接種材料比較安全，但因滅菌時(shí)間較長(zhǎng)，常常使接種材料的外層氧化變褐，以致影響培養(yǎng)效果。升汞有很強(qiáng)的殺菌能力，但浸泡時(shí)間稍長(zhǎng)會(huì)造成接種材料中毒。因此，在草莓組織培養(yǎng)中，如把握好時(shí)間，升汞是應(yīng)用較多的滅菌劑。滅菌后的接種材料，要用無(wú)菌水充分清洗，通常要換水3--5次。

　　接種 以培養(yǎng)無(wú)病毒苗為主要目的的草莓組織培養(yǎng)，所接種的莖尖材料很小，在接種時(shí)首先要求準(zhǔn)確熟練地剝?nèi)∏o尖生長(zhǎng)點(diǎn)，并使用固體培養(yǎng)基比較適宜，接種時(shí)應(yīng)注意不能將整個(gè)莖尖埋入培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基須用1--1．1大氣壓熱壓滅菌20分鐘。

　　一種草莓組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟一、選擇外植體：于5~6月份晴天的下午，取健壯、無(wú)病草莓植株剛抽出的匍匐莖莖尖，大小為0.3~0.4mm，作為組織培養(yǎng)的外植體莖尖；步驟二、準(zhǔn)備培養(yǎng)基：1）分化培養(yǎng)基：用于草莓莖尖培養(yǎng)誘導(dǎo)芽分化階段的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，附加6?BA 0.5mg/L，NAA 0.2mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉6.5g/L，并調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0；2）繼代培固體養(yǎng)基：用于草莓莖尖的擴(kuò)大繁殖階段的基本培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基附加6?BA 0.5mg/L、NAA 0.01mg/L，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0；3）誘導(dǎo)生根培固體養(yǎng)基：待幼苗長(zhǎng)至2cm以上，即可切下單株轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基附加0.2mg/L的NAA，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0；步驟三、滅菌：將步驟一中得到的組織培養(yǎng)的外植體莖尖用0.1%升汞水溶液浸泡莖尖8~10分鐘，并每隔2分鐘搖晃一次，完成滅菌；步驟四、接種：在培養(yǎng)室中，將步驟二中的培養(yǎng)基放置于培養(yǎng)瓶中，將步驟三得到的滅菌后的莖尖，轉(zhuǎn)移至步驟二中得到的分化培養(yǎng)基中；待愈傷組織長(zhǎng)出小植株時(shí)，切取綠色部分...