在做GPC測試時，科學指南針檢測平臺工作人員在與很多同學溝通中了解到，好多同學對GPC測試不太了解，針對此，科學指南針檢測平臺團隊組織相關同事對網(wǎng)上海量知識進行整理，希望可以幫助到科研圈的伙伴們；

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測試樣品要求

（1）樣品盡量純，而且必須可溶于GPC流動相。

（2）為了增加樣品的溶解，可輕微擾動（不要劇烈搖動或用超聲）

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GPC柱選擇

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對于GPC而言，選擇合適的色譜柱是成功分離的核心。從溶劑類型分，主要包括有機相色譜柱，水相色譜柱和蛋白質色譜柱。

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最常用的有機相色譜柱常用的填料基質是苯乙烯和二乙烯苯的共聚物，一般以懸浮聚合或分散聚合方式制成苯乙烯-乙烯基苯多孔微球，以致孔劑制出所需孔徑和孔容。這類凝膠的特點是孔徑分布比較寬，分子量分離范圍比較大，且柱效高。主要用于非極性有機溶劑，丙酮、乙醇一類極性溶劑不能應用。在有機溶劑中，有機凝膠通常都處于溶脹狀態(tài)對不同的溶劑溶脹因子各不相同，因此不能在柱中直接更換溶劑，進樣時也不能帶進大量不良溶劑和空氣。

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蛋白質的填料柱主要分為兩種，氧化硅和纖維素凝膠。氧化硅基質填料的有點是硬度較高，分辨率較高，耐壓性較號，可以使用較高流速。纖維素凝膠填料的優(yōu)點是用途廣泛，甚者可以同時分離蛋白和某些高分子的混合物，如PEG和蛋白，但是硬度較低，流出物較多，建議在低流速下使用。

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流動相選擇

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做GPC檢測時首先要考慮被測樣品的溶解情況，以此確定流動相，還要考慮柱子的測試范圍，應使被測物分子量落在柱子的分子量-淋出曲線線性部分之內，若柱子范圍太窄則可考慮將不同規(guī)格的柱子串聯(lián)使用。

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對于適用于GPC儀器的每一根柱子都會配有詳細的使用說明，使用之前應認真閱讀，嚴格遵從，特別值得注意的是嚴禁超壓（超流量），否則會降低柱效、損毀柱子。如Shim-pack GPC-800系列柱，對于填充溶劑為THF型或者氯仿型能使用其他的洗提液如甲苯、亞甲基氯化物替換，而對填充溶劑為DMF型的GPC柱，流動相不能被其他洗提液替代。

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通常流動相溶劑類型的改變應當在流速不超過0.5 mL/min時候進行，且對于同一根柱最好只使用單一類型的溶劑，頻繁的改變流動相類型會縮短柱的壽命，而GPC儀器柱的價格昂貴，通常上萬元一根。流動相溶劑最好是色譜級，否則需用孔徑為0.2~0.45μm的膜過濾。

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