單抗亞型為什么都是IgM？

做單抗的朋友都不喜歡篩到分泌IgM亞型的細胞株，主要原因是IgM不溶于水，形成五聚體，純化困難，實驗者都對其避之不及；但是過五關(guān)斬六將篩選出來的抗體如果都是IgM亞型的，這個時候往往是“棄之可惜，食之扎胃”。

單抗篩選到IgM亞型，跟免疫的抗原性質(zhì)，免疫佐劑，免疫程序和融合的試劑，甚至與動物本身都有很大的關(guān)系；以上的這些因素大部分是偶然性的因素，只對某些項目，或某個因素的偶然性有關(guān)系，一般來說排除的難度很大。做單抗行業(yè)的有一句話：“你篩選什么就得到什么？”，本文主要介紹如何讓在篩選階段就完美避開IgM。

單抗的篩選，特別是融合之后的初次篩選，我們應(yīng)用的篩選方法基本上都是間接ELISA方法，基本流程如下：包被抗原-細胞上清-羊抗小鼠二抗-TMB底物顯色。這個過程的基本原理是，細胞上清中的抗體與抗原結(jié)合，羊抗小鼠二抗再與抗體結(jié)合；其中的羊抗小鼠二抗是針對所有亞型的小鼠抗體的，當然包括針對IgM亞型的。順著這個邏輯走下去，我們?nèi)绻讯怪嗅槍gM亞型的抗體去除，那么我們在篩選中就篩不到針對IgM亞型了，為了解決這個問題我們新推出的一款二抗:FrdbioRHRP標記羊抗小鼠IgGs△IgM(Cat. No.SAB9010△6),使用這個二抗進行單抗篩選得到的細胞株就不會有IgM,只不過成本略微偏高；當然，如果我們指定要篩選某個亞型單抗可不可以？可以，我們就使用HRP標記羊抗小鼠獨特亞型（IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3）二抗,這些二抗也是單抗抗體亞型鑒定需要用到的。

是不是有了這些二抗利器，我們的單抗篩選就是無往而不利了？顯然不是，F(xiàn)rdbio研發(fā)部門總結(jié)大量的案例發(fā)現(xiàn)，針對某些抗原的單抗無論你怎么篩選，好的抗體偏偏就是IgM，如果非要強行用HRP標記羊抗小鼠IgGs△IgM篩選，可能什么也得不到，最后只能不甘心地選擇IgM。