染料DiI，?DiO，?DiD?和?細胞膜熒光探針DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標記細胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料，當它們與膜結合或者與親脂性生物分子（例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強度很弱）結合時，其熒光強度顯著增強。它們具有很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。

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一旦應用于細胞中，這種染料會在細胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴散，導致在其zui佳濃度條件下，將整個細胞染色。它們不同的熒光顏色：DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標準的FITC和TRITC濾光器一同使用。

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其中，DiO可以被633 nm He-Ne激光激發(fā)，并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長，為標記細胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常卓越的替代品。細胞膜熒光探針DiR#AAT-22070在活體成像或者示蹤中非常有用，因為它們所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，并且在紅外光范圍內(nèi)，其本底熒光水平很低。

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DIR-RGD-NP對微腫瘤的染色。小腸和腸系膜的熒光光譜圖像。顯示的圖像來自mCherry頻道（紅色；左欄）和DIR通道（綠色；中柱）。合并后的圖像（右欄）顯示了在接受DIR-RGD-NP的動物中mCherry和DIR信號（白色箭頭）的zui佳共定位。顯示了每個輸送系統(tǒng)的代表性動物(n?=?可溶性DIR和DIR-NP為4；n?=?12表示DIR-RGD-NP）。

DIR-RGD-NP增強的體內(nèi)保留和更好的共定位。在建立腫瘤（ROI~40000）后，每隔一天給予小鼠四個劑量的可溶性DIR、DIR-NP或DIR-RGD-NP。在指定的時間點24獲得活體動物的mCherry（紅色）和DIR（綠色）熒光圖像?第4次給藥后h。顯示的圖像是合并圖像，顯示了在接受DIR-RGD-NP的動物中mCherry和DIR信號（黃色）的zui佳共定位。顯示了每個輸送系統(tǒng)的代表性動物(n?=?可溶性DIR和DIR-NP為4；n?=?12表示DIR-RGD-NP）。

來源：艾美捷科技

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