牛頓光學(xué)

智能成像，一步到位！

Preface

? ? ? ?細(xì)胞計(jì)數(shù)是大部分生物人的日常。不論是細(xì)胞培養(yǎng)（比如傳代，凍存），亦或是準(zhǔn)備細(xì)胞用于下一步實(shí)驗(yàn)（比如轉(zhuǎn)染），數(shù)細(xì)胞都是一件有些折磨的小事，但也是一件必不可少，非常重要的小事。細(xì)胞計(jì)數(shù)不正確，無(wú)法給細(xì)胞最優(yōu)的生長(zhǎng)環(huán)境，還可能導(dǎo)致加大下游實(shí)驗(yàn)的誤差。

? ? ? ?在對(duì)細(xì)胞的濃度及活率進(jìn)行測(cè)量時(shí)，你是否會(huì)遇到同樣的狀況：明明同一板細(xì)胞，為什么每個(gè)人測(cè)量出來(lái)的結(jié)果都不一樣？為什么我自己數(shù)了幾次差異都比較大？注意以下幾點(diǎn)，能在細(xì)胞計(jì)數(shù)上有很大幫助。

一、細(xì)胞計(jì)數(shù)前的準(zhǔn)備工作

? ? ? ?上樣的樣本室要擦拭干凈，或自動(dòng)計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)板要保持表面潔凈。任何污染都可能導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。對(duì)于手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)，則需要移除和清潔蓋玻片，并用70%的乙醇和水清洗計(jì)數(shù)室。

二、細(xì)胞樣品的制備

? ? ? ?很多情況下計(jì)數(shù)結(jié)果不穩(wěn)定，都是由樣品的不均勻性造成的。此時(shí)可以在加入細(xì)胞樣品前使用渦旋震蕩法或“手指輕彈”的方法搖勻細(xì)胞樣品，并使用移液槍吹打細(xì)胞樣品。按照上述方法混合樣品后，無(wú)論從試管中間還是試管底部得到的細(xì)胞濃度都是一致的。
? ? ? ?避免細(xì)胞碎片、雜質(zhì)的產(chǎn)生，測(cè)量活率時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)溶液長(zhǎng)時(shí)間存放可能會(huì)出現(xiàn)少量顆粒狀沉淀，這時(shí)可在37℃水浴約10分鐘以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。

三、機(jī)器參數(shù)的設(shè)置

? ? ? ?無(wú)論你使用的牛頓光學(xué)Cyto系列自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，或是其他品牌的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，還是顯微鏡+血球細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的手動(dòng)組合，以下儀器相關(guān)設(shè)置都是至關(guān)重要的：

·一致的照明

·正確的對(duì)焦

（錯(cuò)誤對(duì)焦示范圖）

（正確對(duì)焦示范圖）

? ? ? ?對(duì)于以上的影響因素，牛頓光學(xué)Cyto系列全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀提供了很大的便利性，配備了自動(dòng)對(duì)焦和自動(dòng)照明功能，優(yōu)化每個(gè)樣品的對(duì)焦和照明，清晰圈出成圖從而消除了人為引入的可變性，減少對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。同時(shí)牛頓光學(xué)Cyto系列全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可以有效的區(qū)分細(xì)胞雜質(zhì)；碎片等干擾，也能對(duì)較小的細(xì)胞進(jìn)行精準(zhǔn)的計(jì)數(shù)。

（區(qū)分細(xì)胞碎片；雜質(zhì)等干擾）

（牛頓光學(xué)CytoEasy對(duì)PBMC細(xì)胞圈出情況）