熒光是一種光致發(fā)光的現(xiàn)象，熒光物質(zhì)需要在光的照射下才能發(fā)光，照射樣品的光我們叫激發(fā)光，其中某個波長的光是激發(fā)效率最高的，能激發(fā)出最強的熒光，這個就是我們說的最大激發(fā)光波長，也是熒光探針的重要參數(shù)。

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但是做熒光探針研究的你好不容易研究出一種新型熒光材料，測了好多光譜確定了最佳激發(fā)光和最佳發(fā)射光，剛想用激光共聚焦拍攝材料在細胞內(nèi)的成像時卻被各種通道選擇難倒了！?。?/p>

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慌張，到底要用哪個通道采集數(shù)據(jù)

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然后預(yù)約的機時就這樣一分一秒過去了

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和旁邊的儀器管理老師確認過眼神

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你就是他最鄙視的學(xué)生

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別急~菌菌的熒光成像秘籍

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今天教你一個小技能

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技能一·get

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①打開賽默飛官網(wǎng)，在“支持”中找到光譜查看器

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②然后再從首頁打開“應(yīng)用和技術(shù)”，選擇打開“細胞分析”，在左側(cè)的細胞分析產(chǎn)品中點擊“熒光基團”，從中挑選合適的熒光基團，與自己的進行比對，選擇激發(fā)光和發(fā)射光最相近的即可。

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還是覺得這太麻煩?

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菌菌幫你挑選了一系列的熒光染料，一般激光共聚焦上都有的熒光通道，可以滿足大部分實驗的需求。

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技能二·get

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首先是405 nm激光器激發(fā)的各種顏色的熒光染料，這里推薦Qdot系列和BV系列，因為這兩個系列后面的數(shù)字就已經(jīng)表明了其最大的熒光波長，新手只需要記住它們的激發(fā)光是405 nm就可以了。怎么樣？很簡單吧！

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接著是488 nm激發(fā)的熒光染料，推薦BB系列，跟BV系列一樣，后面的數(shù)字代表其最大發(fā)射光波長：

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然后是633 nm激發(fā)的熒光染料，記住633三劍客，APC，APC-R700和APC-AF750即可。

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以上是一些特別常用的激光器對應(yīng)的各個顏色的熒光染料，還有一些不常用的比如458 nm、514 nm和559 nm激光器，這里也列舉一下：

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如果以上還滿足不了各位的需求的話，可以直接上Spectra Viewer (thermofisher.com)上查詢，沒錯，上邊這些圖都是這個網(wǎng)站導(dǎo)出的。

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當(dāng)然如果還是沒有學(xué)會，請馬上call菌菌，親自幫你選匹配通道，非?？桑?/p>

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關(guān)于激光共聚焦成像，今天就分享到這里。如果內(nèi)容對你有幫助，希望大家不要吝嗇點個贊哦，我們會繼續(xù)給大家輸出更多優(yōu)質(zhì)內(nèi)容~

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