StrataClean?樹脂是一種專利無毒、不可燃的羥基化二氧化硅顆粒漿液，可用于純化 DNA，或?qū)⑾♂尩牡鞍踪|(zhì)混合物濃縮。?使用StrataClean??樹脂純化DNA無需進(jìn)行苯酚:氯仿提?。ㄟ@兩種物質(zhì)劇毒且可燃），?提取的 DNA 可直接用于測序，或沉淀用于連接和限制性酶解等操作。使用StrataClean?樹脂純化濃縮蛋白，不需要像傳統(tǒng)的方法那樣沉淀、透析和超濾等操作；只需要將樹脂加入樣品混和并簡單離心即可。與StrataClean?樹脂結(jié)合的即為已經(jīng)濃縮的蛋白，可以用于下游的SDS-PAGE和二維凝膠電泳。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

方法無毒、安全且簡單易用

StrataClean 樹脂是用于 DNA 純化的無酚技術(shù)。固相硅膠型樹脂具有羥基，以與酚羥基相同的方式與蛋白質(zhì)反應(yīng)。采用樹脂處理可將 DNA 與所有限制性內(nèi)切酶和某些修飾酶分離。樹脂是無毒、不可燃，實(shí)驗更加安全

實(shí)驗耗時短

由于 StrataClean 樹脂具有與苯酚相似的特性，因此在中性 pH 下對蛋白質(zhì)具有高親和力，而對核酸則具有較低親和力。該樹脂的硅膠顆粒為不溶性，蛋白質(zhì)通過與 StrataClean 樹脂結(jié)合可在 5 分鐘內(nèi)完全提取。無蛋白質(zhì)的 DNA 可有效用于下游應(yīng)用，例如克隆、PCR、序列分析和 Southern 印跡分析。

使用方法

DNA純化（以鼠尾DNA提取為例）

StrataClean?樹脂可以代替苯酚：氯仿從鼠尾中純化小鼠基因組DNA。所得到的DNA適合用于雜交。

實(shí)驗步驟：

1、準(zhǔn)備鼠尾（6mm左右長度）在750μl 1X STE，11% SDS and 25 μl?of 10 mg/ml?蛋白酶K ，5555°C?消化三小時，或37°C 過夜消化。

2、消化后，加入30μl StrataClean?樹脂，顛倒混勻，然后在離心機(jī)中14,000 rpm?離心10分鐘。

3、提取上清液，并轉(zhuǎn)移到一個新的試管中。加入750 μl冰異丙醇，倒混合。可以看到一個DNA“毛球”形成。

4、將DNA放在14000rpm的離心機(jī)中離心4分鐘，吸出上清液，讓DNA晾干。

5、用250 μl TE緩沖液（10 mM Tris-HCl；1 mM EDTA，pH 7.8）重懸DNA，以備用

蛋白濃縮（以提取限制性內(nèi)切酶和改性酶為例）

StrataClean?樹脂可以用于提取所有限制性內(nèi)切酶和一些改性酶。如果樣品符合以下規(guī)格，則可獲得最佳結(jié)果：

●?最大反應(yīng)體積：250μl

●?最大（最終）酶濃度10%(vol/vol)

●?最大鹽濃度150 mM

●?若體積超過250μl，使用10%的StrataClean?樹脂

StrataClean?樹脂用量，可參考下表

實(shí)驗步驟：

1、使StrataClean?樹脂充分渦旋。

2、使用無酶的槍頭，將StrataClean?樹脂加入反應(yīng)體系，渦旋15秒。

3、在室溫下孵育1分鐘。

4、在2000×g離心1分鐘（可以大于1分鐘）。

5、使用無酶槍頭，小心地將含有DNA清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中，請注意不要吸取到底部的StrataClean?樹脂

6、重復(fù)步驟1-5。

7、使用1X LDS 緩沖液?添加DTT?在95℃從StrataClean?樹脂中講蛋白洗脫備用

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高分文獻(xiàn)精選：

1、Silwal P, Kim Y J, Lee Y J, et al. Chemical mimetics of the N-degron pathway alleviate systemic inflammation by activating mitophagy and immunometabolic remodeling[J]. Experimental & Molecular Medicine?1-14?(2023)

2、Stidham S, Villareal V, Chellappa V, et al. Aptamer based point of care diagnostic for the detection of food allergens[J]. Scientific Reports?12(1): 1303?(2022).

3、Zhou, H., Stein, C.B., Shafiq, T.A.?et al.?Rixosomal RNA degradation contributes to silencing of Polycomb target genes.?Nature?604, 167–174 (2022).

4、Peng, M., Curry, S.M., Liu, Y.?et al.?The ex vivo human translaminar autonomous system to study spaceflight associated neuro-ocular syndrome pathogenesis.?npj Microgravity?8, 44 (2022).?

5、Koch H, Dürwald A, Schweder T, et al. Biphasic cellular adaptations and ecological implications of Alteromonas macleodii degrading a mixture of algal polysaccharides[J]. The ISME journal?13(1): 92-103?(2019).

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