Frdbio單組份TMB顯色液
1.產(chǎn)品介紹:
TMB(3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反應(yīng),且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深藍(lán)色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發(fā)色團。同時反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應(yīng)進(jìn)行。TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA),經(jīng)典的方法是采用AB液分開配制,使用前再混合的方法,TMB單組分顯色液,采用獨特的配方,一種組分就可以顯色,并且長期存放穩(wěn)定??稍陔x心管中直接取100 μl稀釋過的酶標(biāo)二抗,再加入100 μl此顯色液,混合后進(jìn)行驗證。本產(chǎn)品特點:1.即用型:無需混合,方便快捷,減少誤差;2.靈敏度高:不低于AB液;3.穩(wěn)定性好:2-8°C保存,有效期不低于24個月,顯色終止后讀數(shù)穩(wěn)定;4.背景低:底物溶液在630 nm檢測時檢測OD值小于0.045;5.質(zhì)量可靠:產(chǎn)品批間差小。
2.包裝清單:
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝(30ml)包裝(100ml)
包裝(500ml)
包裝(1000ml)
ELS0010
Frdbio TMB單組份顯色液
30ml100ml
500 ml
1000ml
—
說明書
1份1份
1份
1份
3.?保存條件:2-8°C干燥避光保存,?24個月有效。
4.?使用說明:
1)???準(zhǔn)備:用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜鳎ㄓ眉儍羲磸?fù)沖洗),倒出適量的單組分TMB顯色液,待達(dá)到室溫后即可使用。
2)???加液:加完HRP結(jié)合物并溫育一定時間后,洗板3-5次,每孔加TMB顯色液100 μl。?根據(jù)個人實驗需要,在室溫(15-25°C)或37°C下溫育10-30?min。
3)???終止:加等體積的1M鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
4)???讀數(shù):終止反應(yīng)后30?min內(nèi)在450 nm處讀數(shù)。
5.?注意事項:
1)????如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過于強烈。
2)????為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù),或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。
參考文獻(xiàn)引用:
?Engineering bacterial surface displayed human norovirus capsid proteins: a novel system to explore interaction between norovirus and ligands
M Niu, Q Yu, P Tian, Z Gao, D Wang, X Shi?- Frontiers in microbiology, 2015 - frontiersin.org
… resuspended in 500 μL PBS. Finally, a 50 μL of suspension was taken and mixed
with 50 μL?3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine [Friendbio?Science?and Technology
(Wuhan) Co., Ltd., Hubei, China]. After keeping in the dark for?…