Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細(xì)胞膜滲透性的活細(xì)胞熒光染料,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。AM基團(tuán)的存在不僅加強(qiáng)疏水性,使其能輕易穿透活細(xì)胞膜。而且封閉結(jié)合鈣離子的分子部分,本身不發(fā)熒光。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解為鈣黃綠素(calcein),能與胞內(nèi)鈣離子結(jié)合,產(chǎn)生強(qiáng)烈的綠色熒光。因不具有細(xì)胞膜滲透性,從而被保留在胞內(nèi)。與其它活細(xì)胞染料(如BCECF-AM,CFDA)相比,Calcein, AM最適合用于活細(xì)胞染色探針,因細(xì)胞毒性很低,而且不會(huì)抑制任何細(xì)胞功能如增殖或淋巴細(xì)胞趨化性。另外,使用Calcein, AM活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果十分可信,與標(biāo)準(zhǔn)的51Cr釋放法所得結(jié)果一致。

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由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein, AM僅對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,這一特征使其非常適合用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞活力和細(xì)胞的短期示蹤。常常與碘化丙啶PI聯(lián)合使用,因其僅能穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域到達(dá)細(xì)胞核,嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋區(qū)域,并產(chǎn)生紅色熒光(Ex/Em= 535nm/617nm),僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。結(jié)合這些特點(diǎn),Calcein, AM和PI經(jīng)常被結(jié)合用作活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。

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本試劑盒就是結(jié)合Calcein-AM和PI的雙重染料,來(lái)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色標(biāo)記,從而進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞水平的分析。根據(jù)試劑盒優(yōu)化體系,單次以200μl細(xì)胞懸液進(jìn)行染色,可做500次檢測(cè)。

艾美捷?Biogradetech?Calcein-AM/PI，活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒：

中文名稱(chēng)：Calcein-AM/PI，活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒

英文名字：Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit

Biogradetech貨號(hào)：B-CHK103-500T

規(guī)格：500T

保存建議：Calcein-AM/PI，活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒保存：-20℃干燥避光 有效期一年。

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Calcein-AM/PI，活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題：

1、 該試劑盒適用任何細(xì)胞類(lèi)型?

基本上適用于任何含酯酶活性的動(dòng)物細(xì)胞。植物和細(xì)菌細(xì)胞因含有細(xì)胞壁,Calcein-AM不能進(jìn)入因此無(wú)法染色。有可能對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行染色。

2、 用相同濃度有可能對(duì)所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行染色?

對(duì)所有細(xì)胞都用相同的濃度是很不合理的。Calcein-AM和PI的最佳工作濃度根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型差異很大。有必要根據(jù)具體細(xì)胞來(lái)確定最佳染料濃度。參考說(shuō)明書(shū)染料工作濃度優(yōu)化方法。

3、?Calcein-AM對(duì)細(xì)胞有毒?

與其他相似的活細(xì)胞染料比較,Calcein-AM基本無(wú)毒(毒性最小)。