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生命科學的新晉“頂流”——空間轉(zhuǎn)錄組學

2023-03-13 09:25 作者:博奧晶典科研服務  | 我要投稿

空間轉(zhuǎn)錄組(Spatial Transcriptomics)是一種以空間的維度分析和描述特定細胞類型的表達譜,來了解器官、組織和病理狀態(tài)之間的表達差異的技術(shù),它能夠解析組織在不同空間位置的轉(zhuǎn)錄本情況??臻g轉(zhuǎn)錄組技術(shù)結(jié)合常規(guī)的單細胞測序技術(shù)、原位技術(shù)和其他組學技術(shù),可實現(xiàn)細胞異質(zhì)性研究,并定位到組織的空間位置,為疾病研究提供更精準的研究方向,對深入理解疾病致病機理以及靶向治療具有重要意義。

作為近年非?;钴S的組學技術(shù), 空間轉(zhuǎn)錄組一經(jīng)推出立即“引爆”了科研學術(shù)界,在 2020 年被?Nature Methods?評為了年度技術(shù),同時在2022 年再次被評為值得關(guān)注的7大年度技術(shù)之一。毫無疑問,空間轉(zhuǎn)錄組測序成為了繼單細胞測序技術(shù)之后的另一個生物技術(shù)研究熱點。



根據(jù)統(tǒng)計,從 2018 年至 2022 年,空間組學方向共發(fā)表 655 篇論文。尤其是從 2020年 開始,空間組學文章數(shù)量呈爆發(fā)式增長,主要的研究熱點在腫瘤、神經(jīng)科學及病理研究領(lǐng)域。在 2020年,空間“Visium”一詞第一次出現(xiàn)在?Cell?這類頂級期刊上,表明空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)正式邁上新的里程碑。



圖1 10x Visium 空間轉(zhuǎn)錄組發(fā)文情況概覽


包括10x Genomics 在內(nèi)的技術(shù)服務公司在近兩年不斷更新新技術(shù),推出新儀器,發(fā)表文章的數(shù)量也是逐年增長。目前應用10x Visium空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)發(fā)表的高分文章累計170+篇(數(shù)據(jù)來源為10x官方網(wǎng)站統(tǒng)計),包含了新鮮冷凍組織(FF)和石蠟包埋組織(FFPE)兩類樣本類型,物種涵蓋了人、鼠及其他動植物。

博奧晶典已推出 10x Genomics 的 3 種空間組學解決方案,可滿足幾乎所有物種的新鮮冷凍組織(FF)、人和小鼠的石蠟包埋組織(FFPE)完成空間轉(zhuǎn)錄組實驗。

10x Visium FF空間轉(zhuǎn)錄組

它對于物種選擇基本沒有限制,需要對新鮮冷凍的組織切片進行成像,并將其放置在包含與 RNA 結(jié)合的捕獲探針的陣列上。將組織固定并透化以釋放 RNA,使其與相鄰的捕獲探針結(jié)合,從而捕獲基因表達信息。然后以捕獲的 RNA 為模板反轉(zhuǎn)錄合成 cDNA,制備文庫。最后對文庫進行測序,對下機數(shù)據(jù)進行可視化分析,以確定基因在空間上的表達量。


圖2 10x Visium FF 空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)流程

10x Visium FFPE空間轉(zhuǎn)錄組

它可以解決實驗室中經(jīng)福爾馬林固定和石蠟包埋的人、鼠的石蠟塊樣本,針對特定基因,設(shè)計成對探針與其靶標雜交,組織被滲透后,釋放連接的探針對,結(jié)合捕獲載玻片上的探針,以此捕獲基因表達信息,從而獲得空間轉(zhuǎn)錄組情況。


圖3 10x Visium FFPE 空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)流程

10x Visium CytAssist FFPE空間轉(zhuǎn)錄組

它在原有的 10x Visium FFPE 空間轉(zhuǎn)錄組基礎(chǔ)上做了試劑/探針升級,針對人的 90% 低表達基因設(shè)計了三對探針,提高了基因檢出率;樣本類型可兼容石蠟塊和已經(jīng)貼好的石蠟切片,極大地豐富了樣本選擇。同時,對于 10x Visium FFPE 空間轉(zhuǎn)錄組不能解決的樣本問題:如珍貴樣本已經(jīng)貼在普通玻片上,無法轉(zhuǎn)移;切片面積大于捕獲面積,希望只針對感興趣的區(qū)域進行研究;病理科石蠟樣本不允許帶出醫(yī)院;重要的石蠟樣本保存時間太久,質(zhì)檢不合格;研究需要更大的切片面積等,都能應用 CytAssist 儀器完成。


圖4 10x Visium CytAssist FFPE 空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)流程

END

目前博奧晶典已支持發(fā)表 8 篇空間組學文章,其中包括國內(nèi)首篇 10x 空間轉(zhuǎn)錄組學高分文章(點擊查看)。作為 10x Genomics 公司在國內(nèi)的最大服務商,博奧晶典將持續(xù)深耕空間組學領(lǐng)域,致力為科研工作者提供更全面,更優(yōu)質(zhì)的空間組學服務。歡迎各位老師留言咨詢!



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