膀胱癌檢測的現(xiàn)狀

膀胱癌是全球十大最常見的癌癥類型之一，也是泌尿系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤，其中，男性的發(fā)病率和死亡率和是女性的4倍[1]。全球每年因膀胱癌而死亡的人數(shù)約為20萬人，盡管膀胱癌的發(fā)病率相對較高，但如果在早期發(fā)現(xiàn)和治療，其五年生存率可以達(dá)到70%。

因此，早期檢測和治療對于提高膀胱癌患者的生存率至關(guān)重要。

現(xiàn)階段膀胱癌的篩查主要是尿常規(guī)、超聲和膀胱鏡的檢查方式，尿常規(guī)和超聲是較為常規(guī)的篩查方式，但準(zhǔn)確性相對偏低，而作為金標(biāo)準(zhǔn)的膀胱鏡，需要患者的依從性較高，并不適用于常規(guī)的篩查。

通過檢測尿液中游離DNA的液體活檢檢測方式具有樣本易得、完全無創(chuàng)的優(yōu)點(diǎn)，在篩查泌尿系統(tǒng)疾病中得到了越來越廣泛的運(yùn)用。

尿液游離DNA的來源

尿液游離DNA按來源可分為三類：尿路細(xì)胞DNA、經(jīng)腎DNA以及來源泌尿系統(tǒng)感染的細(xì)菌與病毒DNA。泌尿系統(tǒng)腫瘤患者中，腫瘤的部分癌變細(xì)胞會釋放到尿液中，正常細(xì)胞凋亡的DNA呈高度片段化，而來自壞死癌細(xì)胞的DNA能保持其完整性[2]，在泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中，尿液游離DNA的檢測研究較為廣泛，其中關(guān)于膀胱癌的研究最多，有希望為膀胱癌診斷、分期、預(yù)后、監(jiān)測提供更好的方案。

尿液樣本一般研究是取每天第一次的晨尿，泌尿系統(tǒng)在夜間的長時間段中，會有更多的細(xì)胞和細(xì)胞碎片脫落到尿液中，可有效提高陽性檢出率。

尿液游離DNA的提取

尿液游離DNA臨床運(yùn)用的可靠性，很大程度上，取決于尿液游離DNA的分離和檢測過程，尿液中游離DNA的濃度相對較低，且片段大都較短。尿液游離DNA來自尿液的上清層，提取過程要盡可能獲取充足和高質(zhì)量的DNA。由于尿液中游離DNA的濃度較低，1ml的尿液可能不足以進(jìn)行下有分析，在提取環(huán)節(jié)，建議應(yīng)取足量樣本進(jìn)行提取。

尿液游離DNA的臨床運(yùn)用

尿液作為無創(chuàng)診斷的優(yōu)秀標(biāo)志物，擁有大量的研究表明尿液游離DNA可以用來診斷膀胱癌，大體是從兩個方面做出的研究：①分子水平上主要從尿液游離DNA的濃度及完整性上來判斷患者是否患有膀胱癌；②遺傳水平上主要從DNA的表達(dá)、突變和甲基化進(jìn)行分析。

研究者 Brisuda等[3] 在《UROL INT》發(fā)表的研究顯示，使用尿液游離DNA濃度乘以尿量的體積（即尿液游離DNA總量）進(jìn)行研究，不但可以區(qū)分出膀胱癌的患者，而且在腫瘤低分期與高分期之間有顯著差異。該文作者認(rèn)為尿液游離DNA總量有希望區(qū)分不同分期的膀胱癌。

甲基化是現(xiàn)階段腫瘤篩查最為熱門的檢測方法，在膀胱癌組織中TERT啟動子和FGFR3突變較為常見，同樣尿液游離DNA中TERT啟動子和FGFR3突變不僅可以準(zhǔn)確地診斷膀胱癌，而且在監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)方面也具有價值。

尿液游離DNA檢測優(yōu)勢

利用尿液游離DNA來檢測膀胱癌的方法具有較高的準(zhǔn)確度，擁有很好的臨床運(yùn)用前景，不僅用作膀胱癌的診斷，而且對于判斷治療效果、監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)、預(yù)測無復(fù)發(fā)生存期具有重大意義，應(yīng)用多基因的診斷模型將大大提高診斷的敏感性，高敏感度和特異度的診斷模型的應(yīng)用將減少膀胱鏡的使用，減少患者的疼痛。

參考資料：

[1] Sung H，F(xiàn)erlay J，Siegel RL，et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide for 36 Cancers in 185 Countries[J]. CA Cancer J Clin，2021，71（3）：209-249. [2] Casadio V，Calistri D，Tebaldi M，et al.Urine cell-free DNA integrity as a marker for early bladder cancer diagnosis: preliminary data[J].Urol Oncol，2013，31（8）：1744-1750. [3] Brisuda A，Pazourkova E，Soukup V，et al.Urinary Cell-Free DNA Quantification as on-Invasive Biomarker in Patients with Bladder Cancer[J].Urol Int,2016，96（1）：25-31.