這篇文章我們主要從以下三個(gè)角度來(lái)闡述抗體開(kāi)發(fā)中常用物種差異對(duì)抗體的影響：

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l?物種進(jìn)化差異

l?抗體多樣性機(jī)制差異

l?物種個(gè)體差異

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物種進(jìn)化差異

羊駝與人及其他物種親緣關(guān)系遠(yuǎn)，對(duì)免疫原的特異性明顯，因此是非常好的免疫動(dòng)物選擇。但羊駝飼養(yǎng)局限和價(jià)格，限制了后期開(kāi)發(fā)成本和周期控制；另外羊駝抗體的后續(xù)開(kāi)發(fā)更大程度上依賴(lài)噬菌體展示平臺(tái)，較難普及擴(kuò)大推廣（平臺(tái)自身特性我們?cè)诳贵w開(kāi)發(fā)平臺(tái)里再單獨(dú)介紹）；

而兔和鼠的飼養(yǎng)條件相對(duì)寬松，兔和人之間的進(jìn)化比鼠和人之間的時(shí)間相對(duì)要長(zhǎng)，因此與鼠相比，兔更易產(chǎn)生能夠與人、鼠直系同源物交叉反應(yīng)的抗體，這在應(yīng)用于人類(lèi)疾病小鼠模型（基礎(chǔ)研究和臨床前研究）中非常有意義，同時(shí)也避免了使用鼠源一抗后，再使用抗鼠二抗與樣本內(nèi)源交叉反應(yīng)的問(wèn)題。

抗體多樣性機(jī)制差異

對(duì)于抗體的多樣性產(chǎn)生，一般由B細(xì)胞在早期通過(guò)不連續(xù)的基因片段：可變（V）、多樣性（D）和連接（J）基因片段的重排產(chǎn)生差異化，然后在濾泡生發(fā)中心（GC）進(jìn)行體細(xì)胞高頻突變（SHM）進(jìn)一步產(chǎn)生多樣化的抗體庫(kù)。

基于V(D)J基因上不同片段的組合多樣化，體細(xì)胞高頻突變（SHM），同時(shí)可變重鏈 (VH) 和可變輕鏈 (VL) 的組合配對(duì)提供了額外的抗體多樣化，所有這些多樣性因素結(jié)合起來(lái)理論上可產(chǎn)生>10的13次方的抗體庫(kù)容。

?不同的是，相比人和鼠，兔的B細(xì)胞(上圖右)在V(D)J基因重排過(guò)程中優(yōu)先利用一小部分V基因片段，然后B細(xì)胞離開(kāi)骨髓遷移到腸道相關(guān)淋巴組織(GALT)中增殖，除了借助體細(xì)胞高突變，還有另一種胞苷脫氨酶 (AID) 介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)換機(jī)制：通過(guò)讓V(D)J上胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ║），基于基因修復(fù)引入突變，進(jìn)一步增加了抗體多樣性和親和力，因此兔單抗可以很容易地識(shí)別磷酸肽、糖類(lèi)、半抗原和小分子。圖示兔闌尾(兔GALT的主要部位)的組織切片，正在增殖的B細(xì)胞染成綠色，未增殖的B細(xì)胞染成紅色。

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?物種個(gè)體差異

?由于大多數(shù)小鼠品系是近雜交系，通常引起較少的多樣性免疫反應(yīng)；另外兔子的體型更大（實(shí)驗(yàn)用兔子體重平均2.5kg，小鼠25g左右），兔脾臟大概是小鼠的50倍，這有助于收集更多的免疫B細(xì)胞，和產(chǎn)生更多差異陽(yáng)性抗體；兔抗具有更簡(jiǎn)單的IgG亞型類(lèi)型便于工程改造，更穩(wěn)定的IgG結(jié)構(gòu)（小鼠IgG主要有5個(gè)亞類(lèi)，然而兔沒(méi)有IgG的亞類(lèi)，此外，兔輕鏈κ1占有所輕鏈90%，并且κ1可變區(qū)中C80和C171之間存在鏈內(nèi)二硫鍵，使兔單抗更穩(wěn)定）。

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?兔抗特點(diǎn)匯總

穩(wěn)定性：兔抗的輕鏈可變區(qū)和恒定區(qū)之間有額外的二硫鍵，使得穩(wěn)定性更高；

親和力：Epitomics科學(xué)家通過(guò)對(duì)1410種兔雜交瘤單克隆抗體親和力檢測(cè)分析兔單抗親和力接近pM級(jí)別（Landry JP, et al. J Immunol Methods. 2015）；

特異性：另外針對(duì)差異較小的突變分子具有很高的特異性識(shí)別能力；

多樣性：兔源抗體有更廣的識(shí)別表位，多樣性高更易于做差異化的抗體開(kāi)發(fā)；

泛修飾：適合特異性檢測(cè)糖基化、乙?；?、甲基化、泛素化等氨基酸修飾位點(diǎn)；

多應(yīng)用：對(duì)于多種應(yīng)用的兼容性也較高，單克隆能同時(shí)滿(mǎn)足多種應(yīng)用；

鼠模型：規(guī)避了動(dòng)物模型上對(duì)小鼠的選擇導(dǎo)致使用鼠源一抗后抗鼠二抗的交叉反應(yīng)問(wèn)題；

易改造：通過(guò)分析譜系相關(guān)組中的保守序列代表對(duì)IgG的結(jié)構(gòu)和功能至關(guān)重要的殘基，兔IgG更簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)適合CDR移植工程化改造。