一、概念

胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血，經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體，后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級 0.1μm 終端微濾方法處理后，常用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

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二、胎牛血清的作用

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過母乳，所以 IgG 含量低，且含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。

1）?提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2）?提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3）?有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

4）?是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5）起酸堿度緩沖液作用。

6）?提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

三、胎牛血清的儲存

　將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

　　長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。

　　我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

二、如何避免胎牛血清沉淀的產(chǎn)生

　　(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

　　(2)血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。

　　(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

　　(4)勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

　　(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

　　(6)若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。