DND-26,溶酶體綠色熒光探針（LysoTracker Green DND-26）為綠色熒光標記的溶酶體探針，可對活細胞中的酸性隔室進行染色，并已被證明可選擇性地積聚在肺泡 II 型 (AT2) 細胞的層狀體中.具有504/511nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長。

LysoTracker系列探針是對活細胞中的酸性區(qū)室進行選擇性染色的一類熒光染料，該類探針具有幾大重要的特點：

• 選擇性標記酸性細胞器；

• 納摩爾級（nM）濃度即可有效標記活細胞；

• 具有多色探針提供，可根據(jù)情況對樣品進行多標實驗。

LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優(yōu)化。
1.工作液的配制
利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1mM 儲存液稀釋至工作濃度，推薦工作液濃度為50-75nM；
【注意】：為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。若細胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育，會觀察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現(xiàn)象。
2.染色
2 .1?對于貼壁細胞1）將細胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上，加入合適培養(yǎng)基，使其爬片生長。
2）待細胞生長到合適豐度，吸除培養(yǎng)液，加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長狀態(tài)下孵育30min～2h（具體孵育時間需根據(jù)細胞類型而定）。
3）利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡（含合適濾片）下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。
2.2?對于懸浮細胞
1）離心，吸除上清。
2）利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞，于生長狀態(tài)下孵育30min～2h（具體時間需根據(jù)細胞類型而定）。
3）離心，吸除染色液，加入新鮮培養(yǎng)液重懸細胞。
4）置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或加長染色時間。
【注意】：對于懸浮細胞，也可將細胞貼附于經BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上，然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。