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活體轉(zhuǎn)染第五彈活體轉(zhuǎn)染在頭發(fā)再生中的應(yīng)用?。。?！

2022-06-09 17:17 作者:分子科普小feng子 0人讀過 | 我要投稿

碎碎帶著活體轉(zhuǎn)染系列又回來了，本期分享的內(nèi)容活體轉(zhuǎn)染在頭發(fā)再生中的應(yīng)用，隨著現(xiàn)代生活、工作、學(xué)習(xí)的壓力越來越大，很多人都會有脫發(fā)的煩惱。

脫發(fā)雖然不會造成嚴(yán)重的健康問題，但是因為影響美觀，會導(dǎo)致個人形象問題，并因此可能會帶來情緒創(chuàng)傷甚至抑郁。盡管受脫發(fā)困擾的群體如此之大，但目前并沒有有效的解決方法。目前的治療方法，無論是植發(fā)，還是藥物治療，除了貴之外，關(guān)鍵是效果一般，沒有辦法讓毛囊再生，長出新頭發(fā)。

其實，頭發(fā)的生長取決于皮膚毛乳頭細(xì)胞（DP細(xì)胞）的健康與否——它調(diào)節(jié)毛囊的生長周期。研究表明，在禿頂?shù)牡胤?，毛囊不會消失，它們只是縮小了。

本次帶來的是美國北卡羅來納州立大學(xué)程柯團(tuán)隊在 Science Advances 上發(fā)表題為：Dermal exosomes containing miR-218-5p promote hair regeneration by regulating β-catenin signaling的研究論文。

此項研究發(fā)現(xiàn)了一種可以促進(jìn)毛發(fā)再生的miRNA——miR-218-5p，這一由?毛乳頭細(xì)胞（DP細(xì)胞）分泌的?外泌體中的miRNA，通過下調(diào) WNT 信號通路抑制劑 SFRP2 來調(diào)節(jié)毛囊發(fā)育，從而促進(jìn) β-catenin，可以有效促進(jìn)毛囊生長，?或可用于開發(fā)治療脫發(fā)和謝頂?shù)臐摿蜻x藥物。

首先，作者先構(gòu)建毛發(fā)再生小鼠模型，并將小鼠分為3個實驗組，①5%米諾地爾處理；②2D培養(yǎng)的DP細(xì)胞處理；③角蛋白支架3D球狀培養(yǎng)DP細(xì)胞處理，統(tǒng)計第10d，15d，20d小鼠背毛覆蓋率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)角蛋白支架3D球狀培養(yǎng)DP細(xì)胞毛發(fā)生長情況最好。

其次，作者想了解3D球體培養(yǎng)的DP細(xì)胞如何調(diào)節(jié)毛囊再生。鑒于旁分泌信號在這一過程中的重要性，所以研究了外泌體，特別是來自微環(huán)境的外泌體miRNAs。通過miRNA array和Cytokine array檢測2D-DP與3D-DP細(xì)胞中蛋白質(zhì)及miRNA差異表達(dá)，發(fā)現(xiàn)3D-DP分泌外泌體中miR-218-5p顯著提高。

接著，作者驗證3D-DP分泌的外泌體對于背毛再生的影響，通過外泌體分離以及外泌體皮下給藥治療，后進(jìn)行毛發(fā)覆蓋率統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)2D-DP分泌的外泌體的治療效果與米諾地爾沒有顯著差異，而 3D- DP分泌的外泌體加速毛發(fā)生長的程度與細(xì)胞治療相當(dāng)。

最后，為了驗證miR-218-5p 在外泌體介導(dǎo)的毛發(fā)生長中起關(guān)鍵作用，作者選取7 周大的雄性 C57BL/6 小鼠，適應(yīng)環(huán)境一周并脫毛膏去除頭發(fā)。然后將400ng 的miR-218-5p mimic或者inhibitor與 10ul in vivo jetPEI混合并溶于90ul 5% 葡萄糖溶液中，渦旋混合并在室溫下孵育 15 分鐘，形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物，對小鼠進(jìn)行皮下注射，小鼠每個脫毛的背側(cè)皮膚接受 10 次注射，每次10ul，15天后，觀察三組頭發(fā)覆蓋水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組和 miR-218-5p 抑制劑相比，我們可以看到用 miR-218-5p 模擬物治療顯著的毛發(fā)再生效果。