基因編輯原理

CRISPR/Cas9系統(tǒng)是一種原核生物的免疫系統(tǒng)，是細(xì)菌用來抵抗病毒和外源質(zhì)粒入侵的一種防御機(jī)制。目前最成熟且應(yīng)用最廣的是Type II的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，其原理是利用gRNA特異性識別靶序列，并引導(dǎo)Cas9核酸內(nèi)切酶對靶序列的PAM上游進(jìn)行切割，從而造成靶位點(diǎn)DNA雙鏈斷裂，隨之利用細(xì)胞的非同源末端連接（NHEJ）或同源重組（HDR）的方式對切割位點(diǎn)進(jìn)行修復(fù)，實(shí)現(xiàn)DNA水平的敲除、敲入或點(diǎn)突變。

基因點(diǎn)突變方案

gRNA和Cas9復(fù)合物造成靶位點(diǎn)DNA雙鏈斷裂后，細(xì)胞以外源攜帶目標(biāo)點(diǎn)突變的oligo作為模板進(jìn)行同源重組修復(fù)（HDR），將目標(biāo)點(diǎn)突變重組到基因組靶位點(diǎn)。

基因點(diǎn)突變載體

單gRNA載體（含cas9）+Oligo載體

質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

提供載體酶切和測序驗(yàn)證報告。

基因編輯載體應(yīng)用

針對不同基因編輯對象：不同類型細(xì)胞系，斑馬魚及大小鼠等。

針對不同基因編輯目的：移碼敲除，片段敲除，精確敲除，定點(diǎn)突變，片段敲入等，提供對應(yīng)的gRNA載體和打靶載體供客戶選擇。

注明 | 文章是源井生物原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明。

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