條件性恐懼實(shí)驗(yàn)丨這些參數(shù)很重要

一、實(shí)驗(yàn)原理
條件性恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(場(chǎng)景恐懼系統(tǒng))用于小型嚙齒類動(dòng)物(大、小鼠)環(huán)境相關(guān)條件性恐懼實(shí)驗(yàn)研究。嚙齒類動(dòng)物在恐懼時(shí)會(huì)表現(xiàn)出特有的不動(dòng)狀態(tài)(Freezing),動(dòng)物在這種情況下傾向于保持靜止不動(dòng)的防御姿勢(shì)??挂钟羲幒涂?*興奮藥可以明顯縮短不動(dòng)狀態(tài)持續(xù)的時(shí)間。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)對(duì)象被給與一個(gè)聲音信號(hào)(條件刺激),隨后給予電擊(非條件)刺激。該訓(xùn)練稱為條件性訓(xùn)練,訓(xùn)練結(jié)束后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行聲音信號(hào)或環(huán)境聯(lián)系性實(shí)驗(yàn)。一般情況下嚙齒類動(dòng)物對(duì)相應(yīng)的環(huán)境和不同環(huán)境下同樣的聲音信號(hào)都會(huì)做出明顯的條件性恐懼反應(yīng),如僵直靜止不動(dòng)。這種測(cè)試可以在訓(xùn)練結(jié)束后立刻或幾天后進(jìn)行可以提供在條件信號(hào)影響下短期和長(zhǎng)期記憶的信息。
二、實(shí)驗(yàn)裝置
恐懼箱材質(zhì)采用無(wú)味的ABS塑料材質(zhì)或者醫(yī)用有機(jī)板,顏色為黑色或者灰色。上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的恐懼系統(tǒng)包括一個(gè)30cm*30cm,底部可通電的實(shí)驗(yàn)箱、一個(gè)直徑為5cm/10cm?的平臺(tái)、隔音箱(內(nèi)附吸音棉)以及SuperFcs條件恐懼視頻分析軟件,通常平臺(tái)高度與直徑一樣,尺寸可定制。實(shí)驗(yàn)箱上方安裝錄像監(jiān)控器(視頻盒),以錄制動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)箱中的活動(dòng)情況,以供日后分析使用。

三、實(shí)驗(yàn)方法
1、在實(shí)驗(yàn)前一個(gè)星期,每天撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1-5min,連續(xù)7天,(這個(gè)時(shí)間段需要實(shí)驗(yàn)員根據(jù)實(shí)際情況來(lái)定制)借以消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼。
2、訓(xùn)練期:訓(xùn)練時(shí)將動(dòng)物放入恐懼箱內(nèi)適應(yīng)3min,然后給予聲光刺激(持續(xù)30s,70db,3000Hz)和底部**通交流電(持續(xù)2s,0.5mA),結(jié)束后停留30s,將動(dòng)物再放回飼養(yǎng)籠。
3、測(cè)試期:將動(dòng)物重新放回實(shí)驗(yàn)箱,不給予任何刺激,記錄動(dòng)物5min內(nèi)僵直反應(yīng)時(shí)間(除呼吸運(yùn)動(dòng)外無(wú)其他任何行為活動(dòng)的狀態(tài))。測(cè)試后2h,進(jìn)行改變環(huán)境(實(shí)驗(yàn)箱放入分隔板、側(cè)壁換成斑馬紋板或者壁上貼上其他形狀物體)的條件性(無(wú)聲音180s;聲音180s,70db,3000Hz)恐懼測(cè)試。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用酒精檫拭場(chǎng)地,避免氣味干擾。
四、注意事項(xiàng)
1.?實(shí)驗(yàn)前一周每天撫摸大鼠可以明顯減少大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼感以及無(wú)關(guān)刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)箱中動(dòng)物的影響。
2.?盡管還沒(méi)有證據(jù)證實(shí)在**中不同時(shí)間對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有明顯的影響。但是結(jié)合實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)建議實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)時(shí)間盡量在上午9:00至下午15:00之間進(jìn)行,如果有條件,且需要重復(fù)多次檢測(cè),盡量在每天同一時(shí)間段檢測(cè),以減少數(shù)據(jù)的波動(dòng)。
3.?每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用酒精檫拭場(chǎng)地,避免氣味干擾。
4.?動(dòng)物的回避性反應(yīng)差異較大,因此需要檢測(cè)大量的動(dòng)物。如需減少差異或少用動(dòng)物,可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行預(yù)選或按學(xué)習(xí)成績(jī)好壞分檔次進(jìn)行試驗(yàn)。
5.?電流刺激大小需要根據(jù)每批次動(dòng)物的應(yīng)激情況來(lái)調(diào)節(jié),通常小鼠刺激大小為0.2-0.5ma,大鼠為0.6-0.9ma左右。
6.?隔音箱的作用是降低外界噪音、光線以及人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)本身的干擾,隔音箱屬于選配組件,情況允許下建議配置。
