miRNA定量PCR技術(shù)服務(wù)丨加尾法&莖環(huán)法原理
miRNA定量檢測是艾美捷的重點(diǎn)關(guān)注領(lǐng)域，通過提供如miRNA定量檢測試劑盒等精彩方案，來幫助客戶解決miRNA檢測難題。
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一、前提概要
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作為一種內(nèi)源性非編碼小分子RNA, miRNA在許多生命活動中起著重要作用,?如當(dāng)機(jī)體內(nèi)的某些miRNA表達(dá)下調(diào)時,?就會更容易罹患癌癥和其他一系列疾病。這一現(xiàn)象提示,?人們可通過對miRNA進(jìn)行定量檢測來實現(xiàn)對相關(guān)疾病的早期診斷。
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二、miRNA定量PCR技術(shù)服務(wù)
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1.加尾法原理：
特色：
①RNA加尾和引物延伸法，樣本用量少（1μg）且不需分離miRNA。
②采用通用反轉(zhuǎn)錄引物，一次反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可用于上百個miRNA檢測。
③檢測通量高，可同時檢測數(shù)十個miRNAs。
④不同末端成熟miRNA都能被加尾和反轉(zhuǎn)錄，保證定量準(zhǔn)確性。
⑤配合QIAGEN試劑盒，保證實驗可靠性，示意圖如下；
⑥擴(kuò)增產(chǎn)物特異性高，通過產(chǎn)物熱解離曲線（融解曲線）判斷。
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2.莖環(huán)法原理：
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三、microRNA純化試劑盒
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microRNA Purification Kit【microRNA純化試劑盒?Cat#21300】基于Norgen純化柱與無苯酚配方，適用于動物細(xì)胞，組織，細(xì)菌，血液，植物組織。
特色：
①25分鐘提取高質(zhì)量和純度的miRNA（< 200 nt）
②兩柱體系：在純化柱上消除大RNA，在第二根純化柱上捕獲microRNA
③洗脫的microRNA可用于RT-qPCR, Microarrays, Northern Blotting以及NGS等應(yīng)用.
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從Hela細(xì)胞中提取microRNA
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qPCR檢測不同品牌的提取效果
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來源：https://www.amyjet.com/featured/microrna-purification-kit.shtml
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