蛋白質(zhì)組質(zhì)譜鑒定PMF
肽質(zhì)量指紋圖譜(peptide mass fingerprinting, PMF)(又稱蛋白質(zhì)指紋)是一種蛋白質(zhì)鑒定的分析技術(shù),通過將未知的感興趣的蛋白質(zhì)首先裂解成更小的肽,使用MALDI-TOF或ESI-TOF等質(zhì)譜儀對其絕對質(zhì)量進(jìn)行精確測量的一種分析方法。百泰派克生物科技提供基于肽指紋圖譜PMF的蛋白質(zhì)組質(zhì)譜鑒定服務(wù)。
蛋白質(zhì)組質(zhì)譜鑒定PMF
基于肽質(zhì)量指紋圖譜PMF的蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定首先將未知的目標(biāo)蛋白質(zhì)裂解為較小的肽段,之后使用質(zhì)譜儀(如MALDI-TOF或ESI-TOF)準(zhǔn)確測量這些肽段的絕對質(zhì)量,將肽段質(zhì)量與包含理論蛋白質(zhì)序列甚至基因組的數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比較,從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白質(zhì)的鑒定。其中,數(shù)據(jù)庫比對使用生物信息學(xué)的方法實(shí)現(xiàn),計(jì)算機(jī)程序?qū)⒂袡C(jī)體的已知基因組翻譯成蛋白質(zhì),從理論上將其切成肽段并計(jì)算出肽段的絕對質(zhì)量,然后將測得的未知蛋白質(zhì)的肽段質(zhì)量與基因組中編碼的每種蛋白質(zhì)的理論肽段質(zhì)量進(jìn)行比較,對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后返回可能匹配項(xiàng)的方式,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定。PMF技術(shù)僅需少數(shù)肽段質(zhì)量就能準(zhǔn)確鑒定出一個(gè)蛋白質(zhì),與傳統(tǒng)技術(shù)比具有速度快、通量高等優(yōu)點(diǎn),因此可應(yīng)用于蛋白質(zhì)組的質(zhì)譜鑒定。
PMF優(yōu)缺點(diǎn)
基于肽質(zhì)量指紋圖譜PMF的蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定的優(yōu)點(diǎn)是僅須知道肽的質(zhì)量,不需要耗時(shí)的進(jìn)行從頭測序。缺點(diǎn)是目標(biāo)蛋白質(zhì)需要有理論數(shù)據(jù)庫。因此,肽質(zhì)量指紋圖譜PMF法最適用于已經(jīng)獲得基因組序列、cDNA序列或蛋白質(zhì)序列,特別是已經(jīng)完成全基因組測序的樣品鑒定。