廣州化學(xué)品急性吸入毒性GB/T 21605檢驗(yàn)檢測

1、 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物急性吸入毒性試臉的試驗(yàn)?zāi)康?、定義、試驗(yàn)基本原則、試驗(yàn)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于評(píng)價(jià)氣體、揮發(fā)性物質(zhì)或氣溶膠／顆粒物等化學(xué)品的急性吸入毒性作用。

2、 試驗(yàn)?zāi)康?/p>

檢側(cè)化學(xué)品對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急性吸人毒性作用和強(qiáng)度，為亞急（慢）性等吸入毒性試臉提供劑量選擇的依據(jù)。

3、 試驗(yàn)基本原則

各試驗(yàn)組動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)吸入不同濃度的受試樣品，染毒濃度的選擇可通過預(yù)試驗(yàn)確定。染毒后觀察動(dòng)物的毒性反應(yīng)和死亡情況。試驗(yàn)期間死亡的動(dòng)物要進(jìn)行尸檢，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)仍存活的動(dòng)物要處死并進(jìn)行大體解剖。

4、 試驗(yàn)方法

4. 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

首選健康成年小鼠（18g~22g）或大鼠(180g~220g)，也可選用其他敏感動(dòng)物。同性別各劑量組個(gè)體間體重相差不超過平均體重的20％。試驗(yàn)前動(dòng)物要在試驗(yàn)環(huán)境中至少適應(yīng)3d~5d時(shí)間。

4. 2劑量設(shè)計(jì)

根據(jù)所選方法的要求，原則上應(yīng)設(shè)4~5個(gè)劑量組，每組動(dòng)物一般為10只，雌雄各半。各劑量組間距大小以受試物毒性大小和動(dòng)物死亡為宜，通常以較大組距和較少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試。如果受試樣品毒性很低，也可采用一次限量法，即用20只動(dòng)物（雌雄各半），一般2000mg/m3，吸入4h，如未引起動(dòng)物死亡，則不再進(jìn)行多個(gè)劑量的急性吸入毒性試驗(yàn)。需要時(shí)也可做5000mg/m3，或更高濃度吸入4h，或以最大可能發(fā)生的濃度進(jìn)行試驗(yàn)。

4. 3染每

染毒可采用靜式染毒法或動(dòng)式染毒法。

4. 3.1靜式染毒法

靜式染毒是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在一定體積的密閉容器（染毒柜）內(nèi)，加入一定量的受試樣品，并使其揮發(fā)，造成試驗(yàn)需要的受試樣品濃度的空氣，一次吸人性染毒2h或4h。

4. 3.1.1染毒柜的容積以每只染毒小鼠每小時(shí)不少于3L空氣計(jì)，每只大鼠每小時(shí)不少于30L計(jì)。

4. 3.1.2染毒濃度的計(jì)算：染毒濃度一般應(yīng)采用實(shí)際側(cè)定濃度。在染毒期間一般可測4~5次，求其平均濃度。在無適當(dāng)側(cè)試方法時(shí)。可用式（1）計(jì)算染毒濃度：

c=（a×d/V) ×106· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· ·（1 )式中：

c——染毒濃度，單位為毫克每立方米（mg/m3);

a——加入受試樣品的量，單位為毫升（mL);

d——化學(xué)品相對(duì)密度;

V——染毒柜容積，單位為升（L）。

4. 3.2動(dòng)式染毒法

動(dòng)式染毒是采用機(jī)械通風(fēng)裝置，連續(xù)不斷地將含有一定濃度受試樣品的空氣均勻不斷地送入染毒柜，空氣交換量大約為12次／h~15次／h，并排出等量的染毒氣體，維持相對(duì)穩(wěn)定的染毒濃度（對(duì)通過染毒柜的流動(dòng)氣體應(yīng)不間斷地進(jìn)行監(jiān)側(cè)，并至少記錄2次）。一次吸入性染毒2h。當(dāng)受試化合物需要特殊要求時(shí)，應(yīng)用其他的氣流速率。染毒時(shí)，染毒柜內(nèi)應(yīng)確保至少有19％的氧含量和均衡分配的染毒氣體。一般情況下，為確保染毒柜內(nèi)空氣穩(wěn)定，試驗(yàn)動(dòng)物的體積不應(yīng)超過染毒柜體積的5％。且染毒柜內(nèi)應(yīng)維持徽弱的負(fù)壓，以防受試樣品泄露污染周圍環(huán)境。同時(shí)，應(yīng)注意防止受試樣品爆炸。

4. 3.2.1受試樣品氣化（霧化）和輸入的常用方法

4. 3.2.1.1氣體受試樣品，經(jīng)流量統(tǒng)計(jì)與空氣混合成一定濃度后，直接輸入染毒柜。

4. 3.2.1.2易揮發(fā)液體受試樣品，通過空氣鼓泡或適當(dāng)加熱促使揮發(fā)后輸入染毒柜。

4. 3.2.1.3若受試樣品現(xiàn)場使用時(shí)采取噴霧法時(shí)，可采用噴霧器或超聲霧化器使其霧化為氣溶膠后輸入染毒柜。

4. 3.2.2染毒濃度計(jì)算

染毒濃度一般應(yīng)采用動(dòng)物呼吸帶實(shí)際側(cè)定濃度，至少每半小時(shí)一次，取其平均值。各側(cè)定濃度值應(yīng)在其平均值的25％以內(nèi)。若無適當(dāng)?shù)膫?cè)試方法，也可采用式（2）計(jì)算染毒濃度:

c= [a×d/（V1+ V2) ] ×106· · ·· · ···· · ··· ·· · ·（2)

式中：

c——染毒濃度，單位為毫克每立方米（mg/m3);

a——?dú)饣蜢F化受試樣品的量，單位為毫升（mL);

d——受試樣品相對(duì)密度;

V1——輸入染毒柜風(fēng)量，單位為升（L）。

V2——染毒柜容積，單位為升（L）。

4. 4 觀察期限及指標(biāo)

4. 4.1 觀察并記錄染毒過程和觀察期內(nèi)的動(dòng)物中毒和死亡情況。觀察期限一般為14d。

4. 4.2 對(duì)死亡動(dòng)物進(jìn)行尸檢。觀察期結(jié)束后，處死存活動(dòng)物并進(jìn)行大體解剖，必耍時(shí)，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

5、 試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)

評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，應(yīng)將LC50與觀察到的毒性效應(yīng)和尸檢所見相結(jié)合考慮，LC50值是受試樣品急性毒性分級(jí)和標(biāo)識(shí)以及判定受試樣品經(jīng)呼吸道吸入后引起動(dòng)物死亡可能性大小的依據(jù)。引用LC50值時(shí)一定要注明所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬、性別、染毒方式及時(shí)間長短、觀察期限。評(píng)價(jià)應(yīng)包括動(dòng)物接觸受試樣品與動(dòng)物異常表現(xiàn)（包括行為和臨床改變、大體損傷、體重變化、致死效應(yīng)及其他毒性作用）的發(fā)生率和嚴(yán)重程度之間的關(guān)系。